一株野生巨大口蘑新菌株的培养条件研究

张振伟 周伟坚 马紫英 倪 焱 杨水莲 莫美华

（华南农业大学食品学院，广东广州510642））

巨大口蘑（Macrocybe gigantea）属担子菌门（Basidiomycota）、伞 菌 纲（Agaricomycetes）、伞 菌 目（Agaricales）、白蘑科（口蘑科）（Tricholomataceae）、大杯伞属（Macrocybe）的一种珍稀食药用菌，异名洛巴伊口蘑（Tricholoma lobayense）、大白口蘑（Tricholoma spectabilis）[1]。巨大口蘑属高温食用菌，自然界主要分布在热带和亚热带地区，在我国的广西、广东、福建、湖南、台湾等省（区）均有分布[2]。巨大口蘑子实体硕大，外形优美，不易开伞，菌肉致密，口感鲜嫩爽脆，并且含有丰富的粗多糖、粗纤维、粗蛋白和矿质元素，具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗高血压及提高免疫力等多种功效[3-8]。2009 年9月莫美华等在广东省广州市东莞庄路采集到一株野生巨大口蘑菌株并将其命名为新1（菌株号dongguanzhuang），其 ITS 序列已提交 NCBI（美国国家生物技术信息中心）。试验对该菌株菌丝培养条件进行探索，以期为该菌株驯化栽培提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验菌株

巨大口蘑菌株dongguanzhuang（以下称新1菌株，ITS 序列NCBI 编号：JX068527），由野外采集（图1），采用组织分离法分离纯化得到其菌丝体。

1.2 试验培养基[9-10]

培养基1：马铃薯20%，葡萄糖2%，KH2PO40.15%，MgSO40.05%，琼脂2%。

培养基2：葡萄糖2%，蛋白胨0.2%，KH2PO40.15%，MgSO40.05%，琼脂2%。

培养基3：葡萄糖2%，蛋白胨0.2%，琼脂2%。

培养基4：葡萄糖2%，硝酸钠0.2%，琼脂2%。

1.3 试验方法

1.3.1 培养温度试验[11-12]

试验采用培养基1，pH 自然。培养温度分别为24.0 ℃、26.0 ℃、28.0 ℃、30.0 ℃、32.0 ℃、34.0 ℃。观察不同培养温度对新1 菌株菌丝生长（以下称菌丝生长）的影响。每个处理设5个重复。

1.3.2 pH试验[13]

试验采用培养基2。培养基pH 分别调为5.0、6.0、7.0、8.0、9.0，接种后于30 ℃恒温培养箱中培养。观测不同pH 对菌丝生长的影响。每个处理设5 个重复。

1.3.3 碳源试验[11]

分别以可溶性淀粉、麦芽糖、葡萄糖、乳糖、果糖、蔗糖作为培养基2中的碳源，并设不外加碳源的培养基为对照组。……