坦布苏病毒感染诱导雏鸭体内未折叠蛋白反应

赵冬敏，黄欣梅，章丽娇，刘青涛，杨婧，韩凯凯，刘宇卓，李银

坦布苏病毒感染诱导雏鸭体内未折叠蛋白反应

赵冬敏，黄欣梅，章丽娇，刘青涛，杨婧，韩凯凯，刘宇卓，李银

江苏省农业科学院兽医研究所/国家兽用生物制品工程技术研究中心/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室，南京 210014

【】检测坦布苏病毒在雏鸭体内诱导未折叠蛋白反应的信号通路（PERK、IRE1和ATF6），为揭示坦布苏病毒致病机制提供理论基础。取1日龄SPF雏鸭，腹腔接种坦布苏病毒（JS804株），于接种后12、24、36和48 h从对照组和攻毒组各取5只剖杀，分别取肝脏、心脏和脑组织，利用组织总RNA提取试剂盒提取各个组织样品总RNA，反转录获得cDNA。根据未折叠蛋白反应的3条信号通路，选取不同通路中的标志性分子，设计合成特异性引物，利用荧光定量PCR方法检测靶基因。以GAPDH为内参基因，采用相对定量法（2-ΔΔCt），分析靶基因的表达水平。雏鸭肝脏中坦布苏病毒含量最高，心脏次之，脑最低。对未折叠蛋白反应标志性分子GRP78的检测结果显示，脑和肝脏中GRP78表达量持续升高，并在攻毒后36 h达到顶峰（4.21倍和10.14倍），心脏中GRP78表达量仅在攻毒后36 h短暂升高（1.32倍）。PERK信号通路标志性分子ATF4表达水平在肝脏和脑中分别从攻毒后24 h和36 h持续升高至攻毒后48 h，并在攻毒后36 h达到顶峰（2.71倍和6.02倍），心脏中ATF4的表达量则仅在攻毒后36 h时升高（1.57倍）。IRE1信号通路标志性分子XBP1s在肝脏中的表达量升高最为显著（9倍），而脑中EDEM的表达量升高最为显著（3.87倍）且持续时间最长（从攻毒后12 h至攻毒后48 h）。与对照组相比，ATF6信号通路标志性分子GRP94和XBP1u均出现升高现象，虽然两种蛋白在不同组织中表达量变化的时间点和趋势不同，但均在攻毒后36 h出现峰值。……