HPLC法测定枳芩颗粒中黄酮类成分的含量

高红宁 潘雨柔 殷 奕 毛春芹 陆兔林

1.南京中医药大学药学院，江苏南京 210046；2.南京多康商贸有限公司，江苏南京 210000

枳芩颗粒是由枳实、黄芩、大黄、生姜等六味药材组成的医院制剂，具有清热泻火、消积解毒的功效，常用于治疗心脾胃脘有积热，实邪壅滞腑气不通所致疼痛、湿热下利等症。枳实为方中君药，2015年版《中华人民共和国药典》以测定辛弗林含量来控制枳实饮片质量[1]，国内外文献多以测定其黄酮类成分（柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷）来控制饮片质量[2-8]。黄芩为方中臣药，黄芩苷是其质量控制的主要药效成分，已有报道对含黄芩制剂中橙皮苷、柚皮苷、黄芩苷和新橙皮苷一种或几种成分进行含量测定[9-15]。本试验建立了以高效液相色谱法同时测定枳芩颗粒中4种黄酮类成分含量的方法，为整体控制枳芩颗粒的质量提供可靠、科学的实验依据。

1 仪器与试药

1.1 仪器

美国Agilent公司安捷伦1100 高效液相色谱仪，Chem Station 色谱工作站；昆山市超声仪器有限公司超声波清洗器；巩义市英峪予华仪器厂水浴锅；德国梅特勒公司AB104-L分析天平。

1.2 试药

柚皮苷对照品（批号：110722-201011）；橙皮苷对照品（批号：110722-201011）；新橙皮苷对照品（批号：111857-201102）；黄芩苷对照品（批号：110715-200514）；以上对照品均购自中国药品生物制品检定所。枳芩颗粒样品（实验室自制，批号：180112、180118、180123）。乙腈、甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯，水为重蒸水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：汉邦Kromasil C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：乙腈（A）- 0.1 %磷酸水溶液（B），梯度洗脱（0～ 28 min，5% ～ 26% A；28～36 min，26% A；36～48 min，26%～40% A）；流速：1 ml/min；检测波长：280 nm；进样量：10 μl；柱温：30 ℃。

2.2 溶液的配制

2.2.1 对照品溶液的配制 分别精密称取柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷和黄芩苷对照品适量，置5 ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，备用。……