牛蛙源达卡气单胞菌的分离鉴定及毒力特性分析

潘纪汶，王昕，杨诺，韩语，郭桂英，曾纪锋，郑继平*

(1. 海南大学生命科学与药学院，海南 海口 570228；2. 海南大学理学院，海南 海口 570228；3. 海南大学动物科技学院，海南 海口 570228)

牛蛙(Ranacatesbiana)隶属于两栖纲、无尾目、蛙科。由于肉质鲜美滑嫩，营养价值丰富，其皮、油、腺体等其他组织是工业、养殖业和医药业的重要原材料[1]，目前已成为我国主要水产养殖产业之一，年产量已超15万t[2]。近年来养殖密度增加和水体环境逐渐恶化，诱发大量细菌病害例如气单胞菌菌(Aeromomas)、葡萄球菌(Staphylococcus)、爱德华菌(Edwardsiella)和链球菌(Streptococcus)等[3-5]，造成巨大的经济损失。

达卡气单胞菌(Aeromonasdhakensis)是气单胞菌属一新种。2002年，该菌首次从孟加拉达卡城的一个腹泻的儿童病例中分离获得，命名为嗜水气单胞菌达卡亚种(Aeromonashydrophilasubsp.dhakensis)[6]。2008年，该菌又从葡萄牙一个观赏鱼养殖箱水中分离得到，误认为是一个新种而命名为水族箱气单胞菌(Aeromonasaquariorum)[7]。2013年，嗜水气单胞菌达卡亚种与水族箱气单胞菌，经新的分子技术鉴定为同一分类单元，并经全基因测序分析证实达到种的水平，重新定名为达卡气单胞菌(Aeromonasdhakensis)[8]。该菌是一种人、兽和水产动物共患的机会性致病菌，对人、海豚、鳄鱼、鱼、虾等均有感染，主要表现为败血症、肺炎、胃肠炎、皮肤与软组织炎等病症[9-12]。

2019年8月，海南文昌市某牛蛙养殖场出现大量牛蛙死亡，发病牛蛙出现腹部肿胀和体表皮肤出血，剖检见大量腹水，肺充血，肝脏肿大淤血病变。本研究从发病牛蛙肝脏组织中分离获得到一株优势菌株，采用形态观察、生理生化鉴定、结合16S rRNA和gyrA基因序列系统发育分析对其进行鉴定，确认其为达卡气单胞菌；……