BTV-16四结构蛋白的共表达与病毒样颗粒的制备

黄超华，花群义，曹琛福，史卫军，阮周曦，林彦星,叶奕优，陶 虹，王 潇，陈金顶*

(1.华南农业大学 兽医学院，广东 广州 510642；2.深圳海关动植物检验检疫技术中心，广东 深圳 518045)

蓝舌病(bluetongue，BT)是一种虫媒性传染病，属于世界动物卫生组织(Office International des Epizooties，OIE)规定及时上报的动物疫病。BT的流行和暴发会带来巨大的经济损失。目前疫苗免疫是预防BT的主要有效手段[1-2]。蓝舌病病毒(bluetongue virus,BTV)病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)疫苗由于具有DIVA (disabled infectious single animal)性质基因工程苗的特点，因而成为BT疫苗研究的热点之一[3-4]。该VLPs由BTV的4种结构蛋白 VP2、VP3、VP5和VP7组装而成，其中60个VP3二聚体组装形成直径为55 nm的BTV病毒亚核心，其外层为VP7三聚体构成的二十面体结构，两者共同构成BTV CLPs[5]。VP2是BTV型特异性抗原，是BTV血清型的主要决定因素，能引起血凝，诱导产生中和抗体[6]。而VP5是BTV唯一的糖基化蛋白,在VP2免疫中和反应中起到了重要的增强作用[7]。VP5与VP2一样以三聚体形式存在，VP5三聚体最终形成球形基序与VP2三聚体形成的三脚蛋白复合体共同构成BTV VLPs的外衣层结构[3,8-10]。

流行病学调查和有关的病毒分离报道显示，我国存在的BTV血清型非常多，其中1和16型为主要血清型。目前我国虽然在BT疫苗研究上取得了诸多进展，如灭活疫苗、DNA疫苗、重组痘病毒载体疫苗和重组腺病毒疫苗等均能产生中和抗体，对动物有一定的免疫保护作用[11-12]，但在BTV VLPs疫苗方面研究较少。本试验通过基因工程技术获取具有4个独立启动子的载体，构建具有BTV-16型4种结构蛋白基因VP2、VP3、VP5和VP7的重组杆状病毒并进行真核表达，以期为BTV VLPs疫苗的研发奠定基础。……