非洲猪瘟病毒微芯片荧光PCR快速检测技术的建立及初步应用

刘 洋，王新杰，汪葆玥，李 翔，高姗姗，马 静，孙晓明，王传彬，倪建强*

(1.中国动物疫病预防控制中心，北京 102618；2.北京亿森宝生物科技有限公司，北京 100025；3.中国牧工商集团有限公司，北京 100070)

非洲猪瘟(African swine fever，ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus，ASFV)引起猪的一种急性、热性、高度致死性传染病。该病病程短，死亡率高，被世界动物卫生组织(OIE)列为法定通报的动物疫病[1]，我国也将其列为一类动物疫病[2]。2018年8月，我国首次发生ASF疫情。之后该病迅速蔓延扩散，截止2019年12月，除澳门、台湾外，我国大陆所有32个省级行政区均已发生ASF疫情，全国范围内累计扑杀生猪超过100万头，直接和间接损失巨大。同时，ASF在亚洲也持续蔓延扩散，在蒙古、越南、柬埔寨、朝鲜、老挝、缅甸、菲律宾、韩国和东帝汶等多个国家相继暴发疫情，ASF防控面临严峻的国际形势。

目前，世界范围内尚未研制成功安全有效的ASF疫苗，其防控主要依赖于及时、准确的病原检测和消灭传染源[3-10]。为此，我国农业农村部要求，在ASF防控期间，除养殖场外，全国生猪屠宰及生猪产品流通等环节要全面开展检测。我国《非洲猪瘟防治技术规范(试行)》中推荐了3种ASFV病原检测方法，包括双抗体夹心酶联免疫吸附试验、聚合酶链式反应(PCR)和实时荧光聚合酶链式反应(荧光PCR)[3]，其中荧光PCR技术因其敏感性高、特异性强且自动化程度高，被OIE、FAO和我国相继推荐用于ASF的检测[1]。但常规荧光PCR普遍存在核酸提取过程复杂，检测用时较长等缺陷，导致检测效率低下，不能满足于现场快速检测的需求。为……