羊源肺炎克雷伯菌的分离鉴定及毒力基因检测

范培超，史量全，温树波，霍晓伟，薛江东，马德慧

(内蒙古民族大学 动物科学技术学院，内蒙古 通辽 028000)

克雷伯菌属肠杆菌科，有肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、植生克雷伯菌和土生克雷伯菌4 个种[1]。其中，肺炎克雷伯菌(Klebsiellapneumoniae)广泛分布于动物的消化道以及水、土中[2]，作为一种人畜共患菌与条件致病菌，该菌在医院临床感染上的报道十分常见，症状表现为肺炎、腹膜炎、子宫炎以及腹泻，甚至发生败血症[2]。畜禽以及野生动物亦有相当数量的感染情况。近年来，高毒力肺炎克雷伯菌(hypervirulentKlebsiellapneumoniae，HVKP)的出现及流行，且其多样的荚膜血清型(常见如K1、K2、K5、K20、K54、K57)成为了研究热点。高毒力与耐药性曾被认为不重叠出现[3]，但在亚洲的一些HVKP流行国家，关于耐抗菌药物的HVKP分离株报道越来越多，尤其是HVKP获得性碳青霉烯耐药情况的出现，正在对HVKP的临床用药造成威胁。SHON等[4]预测HVKP超毒力和广泛耐药可能会趋同，使药物治疗变得越来越困难，如果不加以干预，HVKP将会变为继耐甲氧西林金黄色葡萄球菌等后的“超级细菌”。

1 材料与方法

1.1 主要试剂与仪器MH肉汤培养基购自青岛高科园海博生物技术有限公司；细菌基因组提取试剂盒购自天根生化科技有限公司；抗菌药物药敏纸片购自杭州微生物制品有限公司；革兰染色液购自北京奥博星生物技术有限责任公司；DL1000 DNA Marker、DL2000 DNA Marker、PCR Mastermix、6×DNA Loadding Buffer购自日本TaKaRa公司；VeritiTMDx 梯度PCR仪购自赛默飞世尔科技有限公司；SPF级昆明小鼠购自郑州大学实验动物中心。

1.2 病死羊剖检内蒙古通辽市开鲁县一羊场病死送检羊，剖检3只，并观察脏器病理变化。……