杏鲍菇菇脚蛋白质提取工艺研究

赵换维 王海华 楚 琰 朱介法

（西安海棠职业学院 陕西西安 710038）

杏鲍菇是一种珍贵的药食两用真菌[1]。杏鲍菇营养丰富，蛋白质、碳水化合物、维生素、钙、铜、镁、锌、铁等含量高[2]。其中，蛋白质含量为12.4%～35%，是常见菜品的3～6倍。杏鲍菇是优质的植物蛋白资源。同时，杏鲍菇在我国产量丰富，其成品在整剪过程中会形成大量的下脚料，一般利用很低，经济价值低。本文采取杏鲍菇下脚料为原料，提取其蛋白质，为提高杏鲍菇利用价值提供参考依据。

一、实验材料

本研究采购杏鲍菇的下脚料为实验原料，将其菇脚进行脱水和烘干、粉碎处理。其粉末作为实验材料。

二、主要试剂

其主要是无水乙醇、NaOH、磷酸、HCl等，牛血清白蛋白，考马斯亮蓝G-250。

三、方法与步骤

（一）计算提取液里蛋白含量的标准曲线

本研究根据考马斯亮蓝法计算蛋白质含量，制作出标准曲线。

（二）提取杏鲍菇菇脚蛋白的工艺流程和方法

1.工艺流程

其流程：样品→pH为8的弱碱液中浸泡30min→50℃时超声波提取→离心机离心→取上清液→调pH至3.6→静置后→离心→得沉淀物→脱色→干燥→得杏鲍菇粗蛋白。

杏鲍菇中提取蛋白的提取率的计算：

2.超声波辅助法提取法

其称取一定量样品，按1∶20料液比加入蒸馏水制备水溶液，浸泡30min。本研究在100W功率，40kHz频率的条件下，进行超声波法处理，每个样做三次，取平均值为最终实验结果。

（三）提取时pH的影响

本研究各称取一定量的样品，在7至12梯度依次加1的6个不同的pH值下，在确定其他提取因素时，对杏鲍菇下脚料采用超声处理。

（四）提取时间的影响

本研究各称取一定量的样品，在同一提取条件下分别按0.5、1、1.5、2、2.5 h进行超声处理。

（五）料液比的影响

本研究各称取一定量样品，按1∶10、1∶15、1∶20、1∶25和1∶30料液比加入蒸馏水，浸泡30min，在相同的提取条件下采用超声处理。

（六）提取次数的影响

本研究称取一定量样品三份，分别装入三个三角瓶中，在相同的提取条件下对样品分别提取1次、2次、3次。将各三角瓶提取液合并处理，测其蛋白含量。

（七）设计正交实验

表1 筛选试验因素水平表

四、结果、分析

（一）标准曲线

蛋白质含量计算所用的标准曲线，如图1所示。

图1 标准曲线

（二）提取pH的影响

在不同pH时，蛋白提取率的变化如图2所示。

图2 pH对蛋白提取率的影响

图2表明，在碱性溶液中，蛋白质易于溶解。在pH为11时，提取率最大；pH大于11时，提取率却下降。本研究则选pH值11为提取的最佳pH值。

（三）提取时间的影响

在不同提取时间处理后，提取率如图3所示。

图3 提取时间对蛋白提取率的影响

从图3可见，提取率随着时间的增加而增加，在一定时间后，增幅减小。综合考虑，本研究最终确定1 h为最佳的提取时间。

（四）料液比的影响

在水料比改变时，提取率如下图4。

图4 水料比对蛋白提取率的影响

图4中，在水料比不断增加时，提取率先上升，后面趋于平稳。综合考虑，本研究选15∶1为提取的最佳水料比。

（五）提取次数的影响

在不同的提取次数下，所得提取率如图5所示。

图5 提取次数对蛋白提取率的影响

图5所示，2次处理的提取率有大幅增加，3次处理增幅很小。综合考虑，本研究选提取2次为最佳提取次数。

（六）正交实验时的结果、分析

表2 正交实验时的结果

由表2极差值可知，各种因素多蛋白提取率影响的强弱顺序为：提取次数>提取pH>提取时间>料液比，最佳工艺组合为：水料比为15∶1，pH为11时，提取1 h，提取2次时。

（七）验证实验

本研究按照最佳提取工艺，做3组平行实验，最终杏鲍菇蛋白的提取率为45.1%。

表4 验证实验