生长抑素通过抑制内质网应激反应减轻肝纤维化小鼠肝损伤研究*

都庆国，陆建文，王建华，龙延滨，薛 飞

肝纤维化(liver fibrosis，LF)是病毒、药物、炎症、脂肪沉积等病因刺激下发生的可逆性的肝脏损伤修复反应，其本质是肝脏损伤后细胞外基质(extracellular matrix，ECM)的沉积过程，导致有功能的肝脏实质被瘢痕组织所替代，并且刺激肌纤维母细胞增殖活化，进一步产生大量的胶原蛋白和未折叠蛋白质[1-3]。内质网(endoplasmic reticulum，ER)作为真核细胞重要的细胞器，主要参与蛋白质的合成、加工、修饰、折叠、运输等一系列生物学过程。当大量的胶原蛋白产生时，内质网启动应激机制，即内质网应激(endoplasmic reticulum stress，ERS)反应，以促进细胞存活。但若应激持续存在，细胞将启动凋亡程序，并加速肝纤维化的发生。因此，通过抑制ERS反应减轻肝脏损伤，控制细胞凋亡是延缓肝纤维化进展的重要途径。有研究发现，生长抑素(somatostatin，SST)可以通过减轻肝脏炎症降低肝酶、减轻肝损伤，但是关于SST是否能够通过减轻肝脏损伤抑制ERS反应，并进一步减缓LF形成，未见相关研究报道。本实验以四氯化碳(carbon tetrachloride，CCl4)诱导小鼠LF动物模型，观察了SST对ERS和凋亡相关蛋白表达的影响，以探讨SST是否能通过抑制ERS反应减轻肝脏损伤，控制LF进展。

1 材料与方法

1.1 动物与试剂 40只10周龄健康野生型C57BL/6小鼠，雌雄不限，体质量(25±3)g，购于上海必凯实验动物有限公司。CCl4、oil、二甲苯、75%乙醇、95%乙醇、无水乙醇、天狼星红染色液、PBS均购于国药集团化学试剂有限公司；注射用SST由瑞士默克雪兰诺公司生产；抗I型胶原(collagen I)购于Southern Biotech；抗Bcl-2、抗Bax、抗CHOP购于Santa Cruz；抗BiP、抗Caspase-9(Casp-9)、抗HSC70抗体购于Abcam；二抗均购自武汉博士德生物工程有限公司。……