羊毛固醇合成酶抑制剂RO对KCs细胞增殖的影响

刘 莉，顾亚男，周 宏，李名聪，罗 欣，张胜权

甲羟戊酸途径是各种生命活动中关键的代谢途径之一，该途径主要与细胞内信号转导、细胞增殖等生理活动进程相关。该途径产生众多的中间产物与下游产物，其中主要包括甲羟戊酸（mevalonic，MVK）、香叶焦磷酸（geranylgeranyl pyrophosphate，GGPP）、法尼基焦磷酸（farnesyl pyrophosphate，FPP）、羊毛固醇（lanosterol，LAN）、胆固醇（cholesterol，CH）等多种脂类物质。研究发现在甲羟戊酸途径中关键酶编码的基因突变能导致单基因遗传疾病，并且这些疾病中的大部分都表现出了皮肤损伤。皮肤是人体抵御外界侵袭的第一道屏障，参与构成的主要是表皮，由角质形成细胞（keratinocytes，KCs）组成。有研究发现表皮是甲羟戊酸代谢途径最活跃的场所之一。甲羟戊酸途径作为影响生命活动的重要途径，在细胞中受到严格的控制，该途径的代谢异常可能参与癌症、心血管系统和神经系统等疾病的发生发展。研究表明羊毛固醇合成酶抑制剂（RO 48-8071）能够抑制乳腺癌细胞中CH的合成，从而无法形成胆固醇类固醇激素的合成前体，下调雌激素水平，抑制乳腺癌细胞增殖。此外，该实验室前期研究指出MVK的杂合突变可导致播散型浅表性汗孔角化症（disseminated superficial actinic porokeratosis，DSAP），这些都表明甲羟戊酸代谢途径在皮肤生长发育和疾病转化过程中扮演重要角色，但其具体的调控机制尚不清楚。该研究使用了羊毛固醇合成酶抑制剂RO探讨甲羟戊酸途径异常对KCs增殖的影响并探索其分子机制。

1 材料与方法

1.1 主要试剂 小牛血清、MEPICF 500培养基、0.06 mol／L Nacl、Coating Matrix基质、HKGS（100×）和0.25%胰酶均购于美国Gibco公司；Dispase购于美国Sigma公司；……