基于重组外膜蛋白研制检测副鸡禽杆菌抗体金标试纸

梅 晨 ， 胡 伟 ， 张 雪 ， 王宏俊

(北京市农林科学院畜牧兽医研究所 畜禽疫病防控技术北京市重点实验室 ， 北京 海淀 100097)

副鸡禽杆菌(Avibacteriumparagallinarum,Apg)可以引起鸡发生传染性鼻炎(Infectious coryza,IC)，该病可使蛋鸡产蛋量下降10%～40%，导致育成鸡正常生长发育受到阻滞并引发淘汰率增加[1]。肉鸡发生该病引起肉品质下降，胴体淘汰率增加[2-3]。如今集约化养殖发展快速，该病的发生和流行逐年上升，给养禽业带来了较严重的损失。目前，国内外常用全菌灭活疫苗预防该病，但如何快速准确地检测副鸡禽杆菌抗体、监测疫苗的免疫效果，是实际工作中亟需解决的问题。

血清学诊断技术是一项简便、快速、安全和经济的诊断方法，其中平板凝集试验[4]、血凝抑制试验(HI)[5]和酶联免疫吸附试验(ELISA)[6]等方法在现行的鸡传染性鼻炎防控中广泛应用，HI和ELISA方法已成为鸡传染性鼻炎诊断技术的行业标准[7]。然而，这些血清学诊断方法主要基于全菌蛋白等菌体来源的天然抗原，存在抗体效价与免疫保护率相关性不强的问题[8-9]，且检测步骤复杂，时间周期也较长。有报道指出，副鸡禽杆菌外膜蛋白HMTp210具有较好的免疫原性，可以作为亚单位疫苗的候选抗原[10]。并且，该蛋白作为诊断抗原所建立的ELISA检测方法具有较好的特异性和较高的灵敏度[10]。本试验以原核表达HMTp210部分蛋白P9[11]成分作为检测抗原，研制了一种副鸡禽杆菌抗体金标检测试纸条。

1 材料与方法

1.1 主要原辅材料 氯金酸、NC膜、样品垫、吸水滤纸及PVC板，均购自北京吉森生物科技有限公司。……