中国对虾NAGase 基因SNP 标记的筛选及与耐高pH 性状的关联分析*

韩 旭 何玉英 李 健 张海恩 周雨欣

(1. 上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心 上海 201306；2. 青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室 青岛 266071；3. 中国水产科学研究院黄海水产研究所农业农村部海水养殖病害防治重点实验室 青岛 266071)

pH 是反映水体水质状况的一个重要指标，正常海水pH 值一般维持在7.8～8.5，养殖过程产生的残饵及粪便会增加水体的氮磷营养盐含量，使养殖水体富营养化，藻类随之会产生过度的光合作用，水污染、极端天气等都会造成海水pH 值升高(Herbeck et al,2013; 李瑞萍等, 2015; Li et al, 2019)。pH 是养殖过程中主要的非生物胁迫因子之一，当水体pH 偏离水生生物生存的适宜范围，会引起水生生物的应激反应，特别是持续较高pH 刺激会增加水生生物的抗氧化酶活性(王芸等, 2011)，引起严重的细胞凋亡(Li et al,2019)和生物DNA 损伤(Wang et al, 2009)，生物体内的Na+/H+交换体(NHE) (李政道等, 2018)、质子泵(H+-ATPase) (胡硕等, 2019)、碳酸酐酶(Carbonic anhydrase,CA) (Liu et al, 2015)等相关离子调控酶的活性发生改变，进而导致对虾生长缓慢、免疫力降低，感染疾病的几率增加(Li et al, 2008)。

N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)又称壳二糖酶，是几丁质酶系的一种(Broadway et al, 1995)，在免疫、蜕皮和消化几丁质食物中发挥重要作用(Xie et al, 2010)，经常作为氧化应激反应的指示酶(Gabai et al, 2004; Corsi et al, 2010)。吕艳杰等(2018)研究表明，1-苯甲基-5-[(E)-2,6-二甲基-1,5-庚二烯](KK-42)处理会加速日本沼虾(Macrobrachium nipponense)NAGase 酶活力的表达，加快旧表皮的降解，从而缩短对虾蜕皮周期；Sun 等(2018)研究发现，脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda) NAGase 主要在表皮和肝胰腺中表达，且在蜕皮期表达量最高。在高pH 环境下，水体中的金属离子的溶解会受到影响(Tucker et al,2008)。……