枯草芽孢杆菌S-16产抗菌蛋白发酵条件优化及蛋白分离纯化

路妍 杨鑫 吴文庆 连紫倩 扈景晗 周洪友

摘要：以抑菌率为指标，采用单因素试验和响应面法对枯草芽孢杆菌S-16菌株产抗菌蛋白的发酵条件进行优化。结果表明，以可溶性淀粉为碳源，大豆蛋白胨为氮源，初始pH值为7.5的LB液体培养基，接种量为4.74%，在温度为34 ℃条件下振荡培养 53 h，转速为 200 r/min为菌株最佳发酵条件。在此条件下纯化得到的抗菌蛋白分子量约为35 ku，对向日葵核盘菌抑菌率达58.6%，比优化前提高了3.19倍。稳定性试验结果表明，抗菌蛋白0～80 ℃、pH值为2～10时均有抑菌活性，说明该蛋白具有很好的热稳定性和酸碱稳定性。

关键词：枯草芽孢杆菌;抗菌蛋白;核盘菌;响应面法;纯化;发酵条件优化

中图分类号： S432.4+4 文献标志码： A文章编号：1002-1302（2021）02-0063-08

收稿日期：2020-05-14

基金项目：内蒙古自然科学基金（编号：2017BS0303）;内蒙古高等学校科学研究项目（编号：NJZY17069）

作者简介：路妍（1982—），女，内蒙古呼和浩特人，博士，讲师，从事植物真菌病害研究。E-mail：luyan820918@126.com。

通信作者：周洪友，博士，教授，从事植物病害生物防治研究。E-mail：hongyouzhou2002@aliyun.com。

向日葵菌核病是由核盘菌[Sclerotinia sclerotiorum （Lib.） de Bary]引起的真菌病害，是世界范围向日葵生产上危害重大并且具有毁灭性的病害之一[1-3]。向日葵核盘菌是一种兼性寄生菌，寄主范围广，侵染形式多样，带菌的种子和菌核为初侵染来源，可侵染向日葵的根、茎、叶、花盘等各个部位，造成植株局部或整体腐烂死亡，在我国发病最严重的是盘腐和根茎腐[4]。菌核病的有效控制包括使用以下1种或多种方法的组合：抗病品种、栽培控制和化学控制。种植抗病品种是控制土传病害最经济且有效的措施，但至今没有发现对菌核病免疫和高抗的向日葵材料[1，5]。……