高效亲水作用色谱-蒸发光散检测应用于甘油磷酸胆碱含量测定

娄良(中山百灵生物技术股份有限公司，广东 中山 528437)

0 引言

甘油磷酸胆碱(glycerylphosphorylcholine，简称GPC)是一种重要的药物原料。GPC的分子式为C8H20NO6P，是有甘油分子和磷酸胆碱基团脱去水分子构成，是重要的神经传递质乙酰胆碱的生物合成前体。GPC能在小肠和通过静脉注射吸收，并且能进入脂蛋白的结构中[1]，因此具有药用价值。研究表明，GPC有保肝作用[2]，有改善老年人认知能力和记忆力的作用[3]，还有多种健脑功效，因此GPC在食品、药品、化妆品领域具有重要应用价值。

GPC含量检测方法的研究有许多。早在1985年，Joseph J Billadello等[4]研究了用核磁共振磷谱对完整组织中GPC的含量进行测定，该方法回收率较高，但灵敏度低，重现性差。程琳等[5]研究了液质联用法，该方法能快速测定GPC的含量，且灵敏度高，稳定性好，但因检测成本高导致该方法应用范围不广。

本研究采用HPLC-HILIC-ELSD方法检测GPC的含量，色谱柱为Venusil HILIC色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)，流动相为0.05 mol/L乙酸铵水溶液-(以乙腈-甲醇=6∶4)=2∶8，流速1.0 mL/min，ELSD检测器，漂移管温度70 ℃。该方法分析速度快，15 min即可完成单个样品分析；主要物质GPC与其他杂质的分离度良好；log峰面积与log进样量的线性关系良好，用外标两点法对GPC进行定量结果准确；方法重现性好，该方法可用于GPC的定量检测。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

仪器：高效液相色谱仪器(岛津CBM-20A)、蒸发光散射检测器(岛津ELSD-LTII)、分析天平(赛多利斯BT125D)、Venusil HILIC(4.6 mm×250 mm，5 μm)色谱柱。

试剂：蒸馏水、甘油磷酸胆碱标准品(含量99.5%韩国药典标准品)、甘油磷酸胆碱供试品(中山百灵生物技术有限公司批号GP20630-GP20632)、乙腈(色谱纯，阿拉丁)、乙醇(色谱纯，阿拉丁)、乙酸铵(分析纯，阿拉丁)。……