结核性脑膜炎脑脊液分子检测技术概述

韩利军 赵雪瑶

结核性脑膜炎(tuberculous meningitis，TBM)是最常见的中枢神经系统结核病，由于无特异的临床表现及较低的实验室诊断敏感度，早期诊断TBM非常困难；而诊断不及时会延误抗结核治疗的时机，导致高病死率和高致残率[1]。因此，寻求切实有效的脑脊液检测手段，提高TBM的早期诊断率显得尤为重要。

近几年随着分子检测技术的快速发展，尤其是测序技术的问世，为TBM早期诊断带来了可能。笔者针对TBM脑脊液分子检测技术的应用现状、最新研究进展进行综述及评论，为指导结核病临床工作提供参考。

一、结核性脑膜炎脑脊液分子检测技术的应用现状

结核性脑膜炎分子检测技术是以临床标本(脑脊液)为检测对象，结核分枝杆菌特异基因为检测标志物，完成对标本中是否含有结核分枝杆菌特异基因的一系列检测过程[2]。结核分枝杆菌核酸扩增技术(nucleic acid amplification test，NAAT)问世已有30余年，通常以IS6110、MPB64、gyrB、rpoB等为靶标，通过聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)进行扩增和检测。近年来，结核分枝杆菌的分子检测技术不断推陈出新[3]，目前临床使用的方法有荧光定量PCR技术，如实时荧光定量PCR技术、GeneXpert MTB/RIF(简称“GeneXpert”)；等温(恒温)扩增技术，如环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification，LAMP)、交叉引物恒温扩增技术(CPA)、实时荧光核酸恒温扩增检测技术(SAT)；探针-反向杂交技术，如线性探针技术、基因芯片法；熔解曲线技术，如探针熔解曲线技术。

1. GeneXpert：GeneXpert是由美国Cepheid公司开发的全自动一体化实时定量半巢式PCR，通过检测ropB基因来检测结核分枝杆菌及利福平耐药性[4]。研究显示，对于结核病患者的脑脊液，GeneXpert检测的敏感度为23%～52%；……