(甘肃畜牧工程职业技术学院,甘肃 武威 733006)
高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)是一种以经典的液相色谱为基础,使用高压输液泵将指定的流动相泵入色谱柱中以进行分离和测定。注入的待测样品通过流动相进入色谱柱内进行分析,分离出的各组依次进入检测器,由记录仪或数据处理系统记录色谱信号。高效液相色谱仪由五大系统构成。高压输液系统主要包括贮液器、脱气处理装置和高压输液泵,其目的是为分离系统提供稳定的能将混合物组分离的高压液体。进样系统由进样口、注射器和进样阀(或自动进样置)组成。其作用是有效地将分析试样送入色谱柱上,简而言之,其功能是取样和进样。分离系统包括预柱(保护柱)、分析柱(色谱柱)和柱温箱。色谱柱是分离系统的重要组成部分,要求分离度高、柱容量大、分析速度快。通用的分析色谱柱一般为10~30 cm长,增加柱长有利于组分的分离,但同时增加了柱压。检测系统由独立的检测器及附属部件构成,其功能是将物理或化学特性转变为可处理的电信号,控制和数据处理系统,记录、处理色谱分析的数据。
高效液相色谱技术具有操作简便、检测精度高以及节约时间等优点,在众多检测方法中脱颖而出。
HPLC可广泛地应用于食品中各营养成分的测定,如氨基酸、糖类、维生素、矿物质等。人体必需氨基酸有八种,传统的检测技术在其测定方面具有一定的局限性,无法保证结果的准确性。……