谷红 裴云逸
玉溪农业职业技术学院 云南玉溪 653100
黄酮类化合物是中药材中最常见活性物质。研究证明:黄酮类化合物具有抗氧化、抗菌等多种生理活性及药理作用,对人类肿瘤,心血管等疾病的治疗和预防有重要意义[1]。
本文选用芦丁为标准对照品,用紫外-可见分光光度法对甘草、葛根、黄芩、金银花四种中药材中总黄酮含量进行测定。
(1)仪器岛津紫外可见分光光度计、电子天平、超声波清洗器、粉碎机、60目筛子。
(2)材料中药材甘草、葛根、黄芩、金银花购自云南玉溪红塔区,芦丁标准品(中检所)、亚硝酸钠(AR)、硝酸铝(AR)、氢氧化钠(AR)、无水乙醇(AR)、水为纯净水。
芦丁标准溶液:精密称定芦丁标准品10mg,置50ml容量瓶中,用体积分数65%的乙醇稀释至刻度,即得浓度为0.2mg/ml的芦丁标准溶液[2]。
5%亚硝酸钠溶液:称取亚硝酸钠2.5g,置50ml容量瓶中,加水溶解并定容至刻度,摇匀,即得。
4%氢氧化钠溶液:称取氢氧化钠4g,置100ml容量瓶中,加水溶解并定容至刻度,摇匀,即得[3]。
10%硝酸铝溶液:称取硝酸铝5g,置50ml容量瓶中,加水溶解并定容至刻度,摇匀,即得。
甘草、葛根、黄芩、金银花中药材粉碎,过60目筛干燥备用。各称取1g,置50ml容量瓶,加入65%乙醇适量溶解,40℃超声波提取45min,用65%乙醇定容至刻度,摇匀,过滤,备用。
准确移取上述芦丁标准溶液0,0.50,1.00,1.50,2.00,2.50ml,分别置10ml具塞刻度试管中,加入5%亚硝酸钠溶液0.30ml,放置6min,加入10%硝酸铝溶液0.30ml,放置6min,再加入4%氢氧化钠溶液4.00ml,用65%乙醇稀释至刻度,摇匀,放置15min,以空白溶液为参比,在508nm处测定吸光度,以测出的吸光度绘制标准曲线,并根据标准曲线计算四种中药材中总黄酮的含量[4]。……