王 禹
(黑龙江省农科院园艺分院,哈尔滨 150069)
择、组培苗培育、组培苗驯化及管理等方面阐述了草莓茎尖组织培养育苗技术,以期促进组培种苗生产及应用。
所有培养基均采用MS+植物激素+7 g/L琼脂+25 g/L白糖,pH 5.4~6.0,0.103 MPa,121 ℃,湿热灭菌20 min。无菌水、滤纸及接种工具,0.103 MPa,121 ℃,湿热灭菌30 min。解剖镜超净工作台紫外灭菌30 min。
从无病虫害、健壮的匍匐茎上剪取2 cm长的茎尖。采集时间:温室为6月初~9月中旬,田间为6月末~8月中旬,此时茎尖生长旺盛,接种后成活率高。
采集的茎尖在流水状态下冲洗2 h,置于超净工作台中,无菌水冲洗3次。酒精消毒1 min,无菌水冲洗3次,每次1 min以上。Hgcl2消毒7 min,无菌水冲洗3次,每次1 min以上。剥取至1 mm内(约留两片子叶)。
将剥好的茎尖,接种到生长培养基上。生长培养基采用MS+1 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IAA,培养温度25 ℃±2 ℃,光照时间12 h/d,培养30 d;继续转入生长培养基中,培养30 d。
将产生的丛生芽切成不超过0.5 cm×0.5 cm大小的丛生团,接种在增殖培养基上,增殖培养基采用MS+2 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA,培养温度25 ℃±2 ℃,光照时间14 h/d,30 d转接一次。可连续继代4次,然后进行复壮培养,复壮培养基采用MS,不添加植物激素,培养温度20 ℃,光照时间10 h/d。
当组培苗长至1 cm高时,切成不超过0.5 cm×0.5 cm的株丛(株丛状易生根),接种到生根培养基上。生根培养基采用MS+0.2 mg/L IBA,培养温度25 ℃±2 ℃,光照时间12 h/d。
当组培苗根系长到1 cm长时,将瓶苗从培养室移至驯化室,让组培苗适应驯化环境。组培苗继续生长至根系3 cm以上,株高4 cm以上时进行驯化。驯化前2 d,把瓶盖打开,让组培苗充分适应驯化环境。……