敲减SNORA31抑制胶质瘤干细胞血管生成拟态的作用机制

刘啸白，王迪，刘云会

（中国医科大学附属盛京医院神经外科，沈阳 110004）

脑胶质瘤是最常见的原发性神经系统恶性肿瘤，约占原发性颅内恶性肿瘤的70%，5年生存率仅5%［1-2］。胶质瘤是典型的血管依赖性实体肿瘤，其丰富的血液供应是胶质瘤浸润性生长和转移的基础［3］。随着肿瘤血管新生研究的深入，贝伐单抗作为有效的抗血管生成药物，在胶质瘤治疗中显示出显著的短期疗效，但长期疗效不佳［4］。因此，深入研究调控胶质瘤血管生成机制具有重要的理论与应用价值。

胶质瘤干细胞（glioma stem cells，GSCs）是具有自我更新和多向分化能力的细胞。最近的研究［5］表明GSCs能够形成血管生成拟态。血管生成拟态是独立于微血管内皮细胞构成的微血管系统，针对GSCs血管生成拟态的分子靶向治疗成为胶质瘤治疗研究的热点。核仁小RNA（small nucleolar RNAs，snoRNAs）主要分布于真核生物细胞核仁，具有多种生物学功能［6］。促红细胞生成素肝细胞受体A2（erythropoietin-producing hepatocellular receptor A2，EphA2）是促进血管生成拟态形成的重要因子，它通过调控细胞外调节蛋白激酶1/2（extracellular regulated protein kinases，ERK1/2）激活磷酸肌醇3激酶（phosphatidylinositol 3’-OH kinase，PI3K），进而调控血管生成拟态的形成［7］。本研究拟探讨SNORA31抑制GSCs血管生成拟态的作用机制。

1 材料与方法

1.1 GSCs的培养与鉴定

参考奚卓等［8］的研究方法，采用中国医科大学附属盛京医院神经外科胶质母细胞瘤患者术中切除的肿瘤组织，PBS缓冲液洗涤肿瘤组织、剪碎，DMEM/F-12培养液培养获得胶质母细胞瘤细胞。胰蛋白酶对培养的细胞进行消化，收集细胞，并使用GSCs培养液 ［含2% B27，10 ng/mL 碱性成纤维生长因子（basic fibroblast growth factor，bFGF），10 ng/mL表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）］重悬，培养并获得GSCs。……