miR-296对人肺腺癌A549细胞恶性生物学行为的影响

刘洋，夏书月，武晶晶

（1.沈阳医学院附属中心医院呼吸与危重症医学科，沈阳 110024；2.中国医科大学生命科学学院医学遗传学教研室，沈阳 110122）

肺癌是全球发病率和死亡率最高的恶性肿瘤，恶性肿瘤致死病因中肺癌占27%，位于恶性肿瘤首位［1］。根据组织病理学特性将肺癌分为小细胞肺癌和非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC），其中NSCLC占80%～85%。相对于其他类型的肺癌，NSCLC增殖、迁移较快，约75%患者发现时已处于中晚期，患者5年生存率较低［2］。

微小RNA是长约22 nt的非编码RNA，它能与目标靶基因特异性结合，通过调控靶基因的表达参与调控细胞分化、增殖、迁移以及凋亡等生理过程，在糖尿病、心力衰竭以及肿瘤等多种疾病的病理生理发展过程中发挥重要作用。研究［3-10］表明微小RNA-296（microRNA-296，miR-296）与结直肠癌、肝癌、胶质母细胞瘤、口腔鳞状细胞癌、胰腺癌、卵巢癌、子宫颈癌等肿瘤的发生密切相关，提示miR-296在肿瘤的发生发展中发挥重要的调控作用。然而目前关于miR-296对NSCLC的调控作用尚不清楚。本研究探讨miR-296在NSCLC增殖、凋亡和迁移等恶性生物学行为中的作用及其潜在的分子机制，旨在为NSCLC的治疗及研究提供新的理论依据及思路。

1 材料与方法

1.1 主要试剂及细胞株

人肺腺癌细胞系 A549细胞（中科院上海细胞库），DMEM/F12培养基［以色列Biological Industries（BI）公司］，胎牛血清（美国Hyclone公司），miR-296抑制剂、阴性对照、引物［生工生物工程（上海）股份有限公司］，jetPRIME 转染试剂（美国 Polyplus Transfection公司），TRIzol（美国Invitrogen公司），反转录试剂盒、universal SYBR qPCR master mix试剂盒、miRNA提取试剂盒、miRNA反转录试剂盒、miRNA universal SYBR qPCR master mix试剂盒、无内毒素质粒小提试剂盒（中国诺唯赞公司……