植物乳杆菌KLDS1.0391 PurR和PurL蛋白的原核表达、纯化及其与细菌素合成启动子的相互作用

李欣芮，赵 桉，范小飘，高文文，尚佳萃，赵鹏昊，赵 乐，周 雪，孟祥晨

（东北农业大学 乳品科学教育部重点实验室，黑龙江 哈尔滨 150030）

植物乳杆菌KLDS1.0391分离自内蒙古传统发酵乳制品，能代谢产生对革兰氏阳性菌和阴性菌都有抑制作用的细菌素[1]，2% NaCl胁迫可促进其细菌素合成[2]，转录组学分析表明，盐胁迫时purR基因和purL基因表达显著下调，推测其可能参与细菌素合成的调控作用。

purR基因编码的PurR蛋白是嘌呤从头生物合成途径中的阻遏蛋白，对嘌呤生物合成途径中11 个pur系列的结构基因具有转录调节作用。不同细菌中pur基因的分布和调控遵循不同的规则[3]，在革兰氏阴性菌大肠杆菌中，嘌呤生物合成基因散布在染色体各处，在革兰氏阳性菌枯草芽孢杆菌中，所有参与嘌呤合成的基因都分布在一个转录单元，即嘌呤操纵子[4]。关于植物乳杆菌purR的研究较少，但有研究表明乳酸乳球菌中的purR与枯草芽孢杆菌中的purR同源[5]。许多代谢调节蛋白具有双重功能甚至是未被发现的功能，purR基因除对嘌呤生物合成具有重要的调控作用外，还对嘧啶合成途径中的pyrC与pyrD基因、与Cysosine转运吸收有关的codBA基因、编码5-磷酸核糖焦磷酸合成酶的prs基因以及甘氨酸合成代谢和一碳单位合成的glyA基因和gcv操纵子等具有调控作用[6-7]。除此之外，近年研究表明，金黄色葡萄球菌中purR突变增强了其致病力[8]，进一步研究发现，purR突变体表现出的毒力增加与嘌呤合成无关，PurR能够结合并调节嘌呤生物合成途径之外的启动子元件，作为一种转录因子，直接结合至毒力基因的启动子，调节毒力相关基因的表达[9]。……