免疫层析技术研究及应用

刘 畅，杨琳燕，王艺霞，张 伟，李道稳，李留安，李 存

(天津农学院动物科学与动物医学学院/天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室，天津 300392)

免疫层析技术(immunochromatographic analysis，ICA)始于20世纪后期，是一种将色谱层析和免疫技术相结合的快速检测技术[1]。由于检测周期短、成本低、对仪器设备和人员没有特殊要求，ICA在即时检测(point-of-care testing,POCT)方面发挥着不可替代的作用，发展前景广阔，其中最经典的一种标记检测技术是胶体金ICA[2]。随着纳米技术的发展和新材料的应用，ICA技术不断创新变革，将具有更广泛的应用范围和更广阔的开发前景。

1 ICA技术简介

1.1 ICA技术原理

以胶体金为例，ICA以胶体金标记抗原或抗体，层析过程中，胶体金标记物随样品溶液通过毛细作用在试纸条上移动，与测试线(test line,T线)上相应的受体结合，聚集后显红棕色[3]。T线的颜色深浅反映了样品中待测物的含量。同时设质控线(control line,C线)，验证检测结果是否有效。

根据待测分子的大小和结合方式，ICA可分为夹心法和竞争法[2]。夹心法是指待测抗原的不同表位分别与两种抗体结合，在试纸条上形成抗体1-抗原-抗体2夹心结构[4]，适用于大分子待测物。竞争法一般用于小分子，T线用待测抗原或抗原类似物处理，它与待测物竞争结合标记抗体，所以T线颜色强度与待测物的含量成反比[5]。

1.2 ICA的发展趋势

1.2.1 灵敏度提高 高灵敏度、定量检测和多元检测是ICA技术的发展趋势[6]。免疫标记材料是影响灵敏度的一个重要因素。胶体金是应用最早、应用最广泛的标记材料，但灵敏度偏低[7]。……