展晖,侯夏宝,赵冰
新乡市中心医院胸部肿瘤外科,河南 新乡 453000
随着人们生活水平的提高和饮食习惯的改变,中国食管癌的发病率和病死率均较高。在中国,鳞状细胞癌是食管癌的常见类型,早期症状不典型,不易被发现,一旦确诊常已发展为晚期,患者5年生存率低于10%。因此,进一步探究食管癌的发病机制能够提高食管癌的早期诊断率,降低病死率,改善预后。八聚体结合转录因子4(octamer binding transcription factor 4,Oct4)是POU转录因子家族中的重要成员,定位于人类染色体6p21.3,能够通过结合于目的基因的Oct结构域,抑制或激活下游靶基因。Oct4对于维持胚胎干细胞的多潜能性及自我更新具有重要作用。研究发现,Oct4在多种肿瘤组织中呈高表达,包括食管癌,但具体作用机制未知,因此,本研究对Oct4在食管鳞状细胞癌细胞侵袭、迁移中的作用及相关机制进行探讨,现报道如下。
食管鳞状细胞癌细胞Eca109购于中国科学院细胞库。兔抗基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)、基质金属蛋白酶 9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)、上皮钙黏素(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、Twist及GAPDH多克隆抗体均购于美国Cell Signal Technology公司;Opti-MEM培养基、辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)(H+L)、CCK-8试剂盒、二喹啉甲酸(bicinchoninic acid,BCA)试剂盒均购于南京凯基生物科技发展有限公司;胎牛血清、DMEM培养基、胰蛋白酶均购于美国Gbico公司;Oct4对照和Oct4 shRNA均购于上海吉玛生物制药技术有限公司;Lipofectamine3000转染试剂盒、Transwell小室均购于美国Corning公司。TE2000荧光倒置显微镜购于日本Nikon公司;迷你双垂直电泳仪、迷你转印电泳仪均购于北京六一仪器厂;……