棉花根际土壤古菌实时荧光定量PCR技术的建立及时空分布特征

管力慧，刘 萍，党文芳，杨红梅，牛新湘，楚 敏，李 萍，高 雁，曾 军，霍向东，张 涛，林 青，欧提库尔·马合木提，李玉国，娄 恺，史应武,3,5

(1.新疆大学生命科学与技术学院，乌鲁木齐 830052；2. 新疆农业科学院微生物应用研究所，乌鲁木齐 830091；3. 新疆特殊环境微生物实验室，乌鲁木齐 830091；4. 新疆农业科学院土壤肥料与农业节水研究所，乌鲁木齐 830091；5. 农业农村部西北绿洲农业环境重点实验室，乌鲁木齐 830091；6. 新疆库尔勒市农业技术推广站，新疆库尔勒 841000)

0 引 言

【研究意义】古菌(Archaea)作为生物领域的一类具有特殊性质，其细胞核无核膜包裹，细胞核和细胞质难区分，和细菌都属于原核生物，但是在进化树上与其有亲缘关系的却是真核生物。古菌不仅耐高温、高盐、低氧、强酸、强碱，还广泛存在湖泊、土壤等普通环境中而且含量非常高[1]。棉花连作导致棉花黄萎病等土传病害发生，影响棉花产量及品质。实时荧光定量PCR技术检测不同生育时期与地区棉花根际土壤古菌数量，有利于探索根际土壤古菌与黄萎病之间的联系以及防治棉花黄萎病。【前人研究进展】顾美英等[2]用平板计数法研究棉花的根际土壤，分析根际土壤微生物生态特征的变化情况以及根际土壤微生物特征变化与黄萎病病原菌的关系。Tellenbach等[3]建立了植物内生真菌实时荧光定量的方法。王晶等[4]运用荧光定量PCR技术和16S rDNA多态性分析对玉米不同生长时期土壤古菌多样性变化进行研究。高峰等[5]用PCR定性测定土壤病原菌，没有定量研究。2011年，肖蕊等[6]运用SYBR Green I PCR技术快速检测棉花根际病原菌数量。……