碱性成纤维细胞生长因子调节小鼠慢性移植物抗宿主病的作用及其机制

刘一岚，帅燕蓉，邓 锐，何光翠，缪晓娟，范方毅

（解放军西部战区总医院血液科，四川 成都 610038）

异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）是部分遗传性疾病或血液系统恶性肿瘤治疗的主要方式，其可使患者后期出现慢性移植物抗宿主病（chronic graft versus host disease，cGVHD）并发症，对患者生活质量造成影响，严重者可导致非复发死亡[1]。近年来移植供应源主要为外周血干细胞和非血缘供者，加之受者年龄上限提高，cGVHD 发病率呈逐年上升趋势[2，3]，因此明确cGVHD 发病机制尤为重要。随着发病机制研究不断深入，发现B 细胞受体相关的信号通路和B 淋巴细胞活化与cGVHD 相关，间充质干细胞（mesenchymal stem cell，MSC）是与之相关的治疗方法，其为一群多功能细胞，具有多向分化潜能和自我更新能力，在造血干细胞移植后具有调节免疫级组织修复作用，其作用机制尚不完全明确，但可知与调节性T 细胞和B 细胞有关。目前MSC 来源主要为骨髓或脐带血体外传代培养，具有一定临床疗效，但需要经过多次输注[4，5]。碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）也为多功能因子，在增殖MSC 方面具有关键作用[6]。本研究通过建立单倍体HSCT 后cGVHD 的小鼠模型，分析bFGF 调节小鼠cGVHD的作用及其机制，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 建立单倍体HSCT 后cGVHD 的小鼠模型 购买8～10 周龄雌性C57BL/6 共36 只，实验分组：空白对照组、外源性MSC 治疗组和bFGF 治疗组，每组12只。所有动物均在无菌恒温恒湿条件下饲养。各组老鼠均给予Co605.5 Gy 全身照射的预处理，其次经腹腔输注供体小鼠10×107个脾细胞/只，空白对照组输注0.5 ml RPMI1640 培养液。

1.2 流式细胞术cGVHD 相关免疫细胞检测 将获得的淋巴细胞浓度调1×105/100 μl，吸取100 μl 细胞悬液至流式检测管中行抗体孵化，调节性T 细胞表型以CD4、CD25 标记，4 ℃条件下孵化30 min。……