致病疫霉游动孢子制备方法研究

杨祝强，王洪洋，唐 唯，李灿辉，刘 晶

(1.云南师范大学 云南省马铃薯生物学重点实验室，云南 昆明 650500；2.云南师范大学 云南省高校马铃薯生物学重点实验室，云南 昆明 650500)

马铃薯作为全球第三大粮食作物，在人类粮食安全中发挥着重要作用[1-2]。然而，由致病疫霉(Phytophthorainfestans)引起的马铃薯晚疫病，在世界范围内导致马铃薯产量降低，甚至引起马铃薯绝收，造成严重的经济损失[3-7]。1845年，马铃薯晚疫病在爱尔兰大暴发并造成饥荒，致使数百万人死亡[8]。当前，晚疫病仍是现代马铃薯生产上的巨大问题[9]。致病疫霉属于藻界(Chromista)卵菌门(Oomycota)鞭毛菌亚门(Mastigomycotina)卵菌纲(Ommycetes)霜霉目(Peronosporales)腐霉科(Pyhiaceae)疫霉属(Phytophthora)[10]。致病疫霉的生活史分为无性世代和有性世代，在无性世代中，孢子囊是致病疫霉无性阶段最主要的繁殖器官和侵染器官。与菌丝体相比，孢子囊抵抗不利环境的能力更强且更易于传播。当外界环境湿度较高、温度在24～25 ℃时，孢子囊直接萌发产生芽管[11]；当外界环境湿度较高、温度较低(最适温度10～15 ℃)时，孢子囊释放出游动孢子[3]。致病疫霉的游动孢子呈肾形，具2根鞭毛，能在水中游动；游动孢子侵染寄主植物前，其鞭毛脱落，形成球形的休止孢，之后休止孢萌发产生芽管侵入寄主体内[12]。游动孢子的主要作用是帮助病原菌扩散到合适的侵染部位进行侵染，并且游动孢子也是非常有效的繁殖体[13-14]。无论是孢子囊直接萌发还是孢子囊释放游动孢子均能够引起田间多次再侵染并造成病害大流行[15]。马铃薯种质资源抗晚疫病评价、抗晚疫病基因挖掘及克隆、致病疫霉致病机制等相关研究中都需要大量的游动孢子作为接种菌源及研究材料。……