姜黄素对肺癌相关LncRNA表达及厄洛替尼敏感性的影响

徐亚莉，曹晓静，朱小珍，朱光辉

温州医科大学附属第二医院 药学部，浙江 温州 325027

肺癌是全世界范围内发病率及病死率均居首位的恶性肿瘤，且呈现出快速增长的趋势[1]。表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）突变是导致肺癌发生发展最主要的原因之一，其持续活化将导致下游多种原癌基因网络的激活[2]。EGFR-酪氨酸激酶抑制剂（tyrosine kinase inhibitors，TKI）可显著抑制EGFR活性，阻止下游信号的转导，其成员厄洛替尼是目前晚期肺腺癌患者的一线用药[3]，但获得性耐药的发生极大地限制了其临床疗效[4]，因此，明确影响EGFR-TKI类药物抵抗发生的关键因素成为亟待解决的问题。长链非编码RNA（long non-coding RNA，LncRNA）作为机体重要的表观遗传调控分子群，参与影响细胞EGFR-TKI的敏感性[5]。近年有研究指出，姜黄素在EGFR-TKI类药物治疗肺癌的过程中可能发挥着积极作用[6]，但具体机制仍需进一步明确。本研究以EGFR敏感性突变的肺癌细胞株PC9为体外模型，探究姜黄素对肺癌相关LncRNA表达的影响及其与细胞TKI药物敏感性的关系。

1 材料和方法

1.1 细胞分组 实验细胞包括非小细胞肺癌（nonsmall cell lung cancer，NSCLC）EGFR突变PC9细胞株（PC9 WT）和PC9厄洛替尼抵抗细胞株（PC9 ER）。培养环境：5% CO2，37 ℃，湿度100%。

细胞分组：将PC9 WT细胞分为对照组及实验组，将PC9 ER细胞分为抵抗组及处理组。在450 mL RPMI-1640培养基（美国Gibco公司）中加入10%胎牛血清（50 mL，美国Gibco公司）及10 μmoL姜黄素（美国Sigma-Aldrich公司）或等体积0.9%氯化钠溶液作为细胞培养液备用，实验组及处理组采用含20 μmol·L-1姜黄素（美国Sigma-Aldrich公司）的RPMI-1640培养液（美国Gibco公司）培养，对照组及抵抗组采用含等体积0.9%氯化钠溶液的RPMI-1640培养液培养，培养时长72 h[7]。……