枣花柱头荧光染色方法的优化*

任海燕，王永康，赵爱玲，薛晓芳，李 毅，李登科

（山西农业大学果树研究所，果树种质创制与利用山西省重点实验室，太谷 030815）

枣落花落果严重，坐果率低，一般自然坐果率仅1%左右[1]，且枣胚败育普遍存在[2]。许多学者针对这一现象，开展了枣柱头可授性、花粉萌发情况、授粉受精等开花生物学特性的研究，国内研究较多的使用联苯胺-过氧化氢法（MTT）测定柱头的可授性[3-6]，此方法虽快捷，但可授性强弱指标难以量化。相比而言，利用荧光显微法判断柱头可授性和花粉管生长较为直观准确[7-11]。枣花柱微木质化，花柱细胞组织较厚，在荧光显微观察时易出现花粉管生长过程被花柱组织遮挡的现象，因此在试验过程中，常采用适宜浓度的NaOH作为软化剂软化花柱，可以达到预期的效果。但若NaOH浓度使用不当，或出现花柱压片不成形，或花粉管结构不清晰等影响试验效果。为了提高枣花粉管生长特性等相关试验的效率，以期得到理想的试验图片，本研究以‘冷白玉’枣花为试材，对软化方法、染色pH环境进行了优化，以期为枣花粉管生长特性的研究提供实验方法依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试材料‘冷白玉’枣采自山西省农业科学院果树研究所国家枣资源圃，该品种盛花期为6月上旬，选取无病、长势良好的枣吊，定花定果，以黄蕾期（蜜盘刚出蜜）进行人工授粉，授粉品种为‘伏脆蜜’，花粉萌发率为94%。

1.2 试验方法

1.2.1材料

采集枣花，置于FAA（70%乙醇∶甲醛∶冰醋酸=90∶5∶5）固定液中固定备用。

1.2.2不同软化处理的优化