狐狸肉源性成分快速检测方法的建立

郑方媛 周秀雯 袁 望 冯 涛 李素芳 潘家荣

(中国计量大学生命科学学院/浙江省海洋食品品质及危害物控制技术重点实验室/海洋食品加工质量控制技术与仪器国家地方联合工程实验室，浙江 杭州 310018)

肉类及其相关产品的掺假欺诈行为在世界各地屡有发生，影响消费者对食品安全的信心[1-2]。2013年，中国新闻媒体报道了一个犯罪团伙利用狐狸、水貂、老鼠等未经检验检疫的动物肉制品，添加明胶等伪造羊肉，非法盈利超过1 000 万元人民币[3]。2014年，全球最大的连锁零售企业沃尔玛因进货查验制度未落实到位，在标签为五香驴肉的产品中鉴定出狐狸DNA[4]。类似马肉丑闻[5]报道的事件不仅破坏企业的社会声誉，更会对经济、宗教、道德造成严重影响，甚至对消费者健康造成损害[6-7]。狐狸臭腺肉体通常不作为食用肉，流入市场会引起消费者不适甚至健康问题。针对肉类掺假严重的现状，迫切需要建立快速、可靠和特定的动物种类识别鉴定方法保护消费者免受这些恶意行为的侵害。

目前，肉源性成分的鉴定大多利用基于DNA 以及PCR 分析方法相关的技术，如实时PCR 技术[8]、聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性分析(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism，PCR-RFLP)[9]、物种特异性/常规PCR[10]或DNA 条形码[11]。Wu 等[6]以核DNA 为靶点，结合多重PCR和实时荧光PCR 技术，通过分析电泳带、扩增曲线和标准曲线，有效地鉴别了狐狸肉、貂肉、狗肉和兔肉成分，研究表明实时荧光定量PCR 检测结果具有线性良好(R2＞0.99)、重复性好等优点。Li 等[12]利用双重PCR 技术结合核酸内切酶消化，通过分析产物电泳长度，DNA 测序鉴定出牛肉和羊肉中1%(m/m)含量的狐狸、貂和浣熊成分。……