兔可食性组织中杆菌肽残留量HPLC-MS/MS测定方法

聂贞，全家兴，王美红，张小龙，蒋玥，卜仕金

(扬州大学兽医学院 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心，江苏 扬州 225009)

杆菌肽是由一组类似的多肽成分组成的混合物，其中杆菌肽A、B1和B2组分被认为最具抗微生物活性[1-2]。兽医临床上常见以杆菌肽锌和杆菌肽亚甲基水杨酸盐形式用于畜禽促生长和防治动物的坏死性肠炎[3-5]。在欧盟，亚甲基水杨酸杆菌肽还被推荐用于治疗由产气荚膜梭菌引起的兔坏死性肠炎。杆菌肽在猪和禽等主要生产动物的可食性组织中及奶中残留量的检测方法已有很多研究报道[6-10]，但杆菌肽在兔的可食性组织中残留量的检测分析方法至今未见报道。因此，开展兔可食性组织中杆菌肽的残留检测方法研究，对杆菌肽今后推广应用于家兔和指导临床合理用药具有重要的现实意义。研究旨在建立兔可食用组织(肌肉、脂肪、肾脏和肝脏)中杆菌肽残留标志物的高效液相色谱串联质谱联用(HPLC-MS/MS)检测法，为兔可食性组织中杆菌肽残留的监控提供技术手段，这对保障人类消费者食用动物源性食品的安全性具有重要意义。

1 材料与方法

1.1 仪器和试剂 仪器：AB sciex Qtrap 6500plus三重四极杆串联质谱仪；AB sciex ExionLCTMAC高效液相色谱仪；XBridge®C18色谱柱(2.1 mm×100 mm，3.5 μm)；EppendorfCentrifuge 5810 R台式高速冷冻离心机；QUINTIX124-1CN电子天平；上海沪西WH-1微型涡旋混合仪；Eppendorf可调移液器(10 μL、100 μL、5000 μL)。

试剂：甲醇、乙腈(色谱纯，美国TEDIA公司)；三氟乙酸(色谱纯，上海MACKLIN公司)；甲酸、氨水(色谱纯，上海阿拉丁公司)；三氯乙酸、正己烷(分析纯，国药集团化学试剂有限公司)；……