HPLC-MS/MS法同时测定烟草中22种Amadori化合物

王晓瑜，王昇*，刘鸿，陈志燕，潘立宁，秦亚琼，刘惠民，范忠*，周芸

1.中国烟草总公司郑州烟草研究院，郑州高新技术产业开发区枫杨街2号450001

2.广西中烟工业有限责任公司技术中心，南宁市北湖南路28号530001

烟草加工过程中会伴随美拉德反应发生，对烟草的颜色和品质产生重要影响。美拉德反应初始阶段，还原糖和氨基酸发生加成反应，产物经Amadori重排生成相对稳定的Amadori化合物［1］。Amadori化合物是重要的香味前体物质，快速、准确地对其测定对识别和监测食品和烟草加工过程中的美拉德反应具有重要意义［2-4］。早期关于Amadori化合物测定的研究对象均是烟叶样品，主要是基于液相色谱-光谱检测技术［5-8］。例如，1971年Noguchi等［5］研究了自然陈化4年内烤烟烟叶中Amadori化合物质量分数的变化，采用强酸性阳离子交换色谱与茚三酮柱后衍生并用紫外-可见检测器（UV-Vis）分析了6种Amadori化合物（Fru-Pro、Fru-Ala、Fru-Val、Fru-Thr、Fru-Phe、

Fru-Tyr）质量分数的变化，但该方法存在氨基酸干扰，且灵敏度较低。1982年，Gary等［6］用硝基苯甲醛肟（PNBO）对烤烟中选定的3种Amadori化合物进行衍生后，用液相色谱（氨基反向柱）进行分离，示差折光检测器（RI）检测，但该法前处理较为繁琐，且不同Amadori化合物的保留时间相似，检测灵敏度及选择性也较差。1989年，Hennighan等［7］利用液相色谱（阴离子交换柱）分离Amadori化合物，采用2,3,5-三苯基氯化四氮唑（TTC）对Amadori化合物进行柱后衍生和UV-Vis检测，实现了烟草中6种主要Amadori化合物的分离，但灵敏度仍较低。

随着MS技术的快速发展，在2000年后文献报道的关于烟叶及食品、模拟反应体系中Amadori化合物的检测方法主要以HPLC-MS/MS为主［9-12］，也有毛细管电泳-质谱检测法［13］，这些方法均有效克服了传统液相色谱-光谱检测技术灵敏度低、选择性差的问题。……