鱼类致病嗜水气单胞菌外膜蛋白P5的原核表达、免疫保护及抗血浆杀菌作用研究

荣 娜，简思杰，孙 薇，康 超，伍娜娜，刘 祥

(陕西理工大学 生物科学与工程学院，中德天然产物研究所，陕西汉中 723001)

嗜水气单胞菌 (Aeromonashydrophila)属于弧菌科气单胞菌属，是一种在水生环境中广泛存在的条件致病菌，可诱发水生动物局部出血和败血症，给水产养殖业带来巨大的收入损失[1-2]。对于该菌的防治，传统上主要采用抗生素药物，但长期使用会导致菌株抗药、机体抗生素残留和水体污染等问题[3]。疫苗免疫安全性高、无毒害，但目前普遍应用于水产养殖的灭活疫苗存在免疫效果欠佳和二次感染的风险[4-5]，因此有必要研制有效防治嗜水气单胞菌的新型疫苗。亚单位疫苗是一种以纯化的蛋白、核酸或多糖等免疫活性片段作为组分的新型疫苗，具有安全稳定且免疫持久等优点[6-7]，受到广泛关注。

外膜蛋白(Outer membrane protein，OMP)是细菌外膜的主要构成部分，在维持细菌结构完整性和物质转运等方面有着重要作用[8-9]。此外，外膜蛋白具有高度的免疫原性，是一种潜在的保护性抗原[10]。P5蛋白是革兰氏阴性细菌的一个主要外膜蛋白，也是OmpA蛋白的超家族成员，参与了细菌在体内的定植[11]。有研究表明，P5蛋白免疫原性较强，可激发机体体液免疫产生保护性抗体，是参与机体免疫应答的早期抗原[12]。谢乐新等[13]将副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5分段表达，发现表达的3个蛋白均表现出良好的免疫原性和抗原性。王海峰等[14]研究显示，P5免疫动物后能诱导产生高水平特异性抗体，并可显著保护豚鼠抵抗副猪嗜血杆菌感染。……