Xpert MTB/RIF对结核菌利福平耐药的诊断价值及rpoB基因突变特点的分析

高春景 杨洋 阚宗卫 成松 魏素梅 胡凯

目前，耐多药结核病(Multidrug-resistant tuberculosis，MDR-TB)和利福平耐药结核病(Rifampicin-resistant tuberculosis，RR-TB)仍然是全球结核病控制工作所面临的严峻问题。据世界卫生组织(World Health Organization，WHO)估算，2018年全球新增约50万利福平耐药结核病病例，估算其中中国新增利福平耐药结核6.6万例，我国也是MDR-TB和RR-TB 30个高负担国家之一，MDR-TB和RR-TB的疫情非常严重[1]，因此利福平(Rifampicin,RIF)耐药的早期诊断尤其重要。Xpert MTB/RIF检测是一种自动半巢式实时PCR系统，使用覆盖rpoB基因RRDR核心区的五个重叠的分子信标探针来实现结核病和利福平耐药的检测，约2h可以得到结果[2]。2014年WHO推荐该技术用于多种结核病的诊断及利福平耐药检测[3]。本研究旨在分析Xpert MTB/RIF检测对利福平耐药的诊断价值及rpoB基因的突变特点，现汇报如下。

资料与方法

一、研究对象

回顾性纳入2016年1月至2020年6月期间来院就诊患者相同标本同时进行了结核分枝杆菌培养及药敏试验和Xpert MTB/RIF检测，且任一种方法检出MTB。

二、研究方法

1.结核分枝杆菌培养及药敏试验：采用改良罗氏培养基分枝杆菌培养并行菌种鉴定及比例法药物敏感试验(培养药敏)，具体步骤按照《手册》[4]进行。

2.Xpert MTB/RIF检测：具体操作步骤按照Cepheid公司的Gene Xpert仪器说明书[5]进行。结果判读：①5条探针结合的是野生型结核分枝杆菌，至少两条探针结合到标本提取出的DNA上，就表示检测到结核分枝杆菌，MTB这一项检测结果就会报告阳性；②A-E探针有1条或者多条探针阴性，即该探针没有结合到患者样本DNA上进行扩增，则代表患者样本中的结核分枝杆菌的探针相对应的rpoB基因片段有发生突变，阻止利福平对结核分枝杆菌起作用，即对利福平产生了耐药结果；……