miR-182靶向调控PI3K/AKT/FOXO3a信号通路对胶质瘤干细胞生物学行为的影响及其机制研究

贾晓琼 孙秋颖 刘晓宇 信涛

胶质瘤是临床较为常见的原发性恶性颅脑肿瘤疾病，病灶组织呈浸润性生长，故外科手术难以彻底切除，具有术后复发率高、治疗困难、生存时间短等特点[1-2]。人胶质瘤干细胞(Glioma stem cells，GSCs)具有自我更新、无限增殖、多向分化等生物学功能的肿瘤细胞，其可侵袭和播散至远处脑组织，是胶质瘤疾病复发及难以根治的重要原因[3-4]。因此有效抑制GSCs生物学行为是治疗胶质瘤的关键所在。miR-182是一种定位于7q32.2染色体的微小核糖核酸(MicroRNA，miRNA)，其可通过靶向调控磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(Phosphatidylinositol 3 kinase/protein kinas B，PI3K/AKT)信号通路促进肝癌细胞生长、增殖和抑制凋亡[5]，且人类叉头框O蛋白3a(FOXO3a)是PI3K/AKT信号通路的下游细胞因子，主要受AKT调控[6]。目前miR-182对于GSCs增殖、凋亡、迁移、侵袭等生物学行为的影响研究较少，且缺乏相关的机制研究，因此本研究拟观察miR-182对GSCs生物学行为的影响，并探讨其靶向调控PI3K/AKT/FOXO3a信号通路的作用机制，从而为胶质瘤的临床治疗提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 胶质瘤患者及组织标本来源

20例胶质瘤患者均为内蒙古自治区肿瘤医院神经外科2014年1月—2015年10月住院行外科手术切除治疗的患者，男15例，女5例，年龄47～68岁，平均年龄(56.7±8.2)岁，术后病理确诊为星形细胞瘤7例，混合胶质瘤5例，多形性胶质母细胞瘤4例，间变性室管膜瘤4例(其中1例经实验室分离，并最终成功培养出GSCs)。所有患者均知情本研究方案及研究目的，本研究方案已通过医院伦理委员会批准。

1.2 研究方法

1.2.1 GSCs分离、培养及分选 将采集到的新鲜胶……