钩吻素子抗糖尿病大鼠神经病理性疼痛的作用及其与脊髓别孕烯醇酮的关系

黄慧慧，陈火树，钟志凤，许 盈，俞昌喜

糖尿病性神经病理性疼痛(diabetic neuropathic pain, DNP)是神经病理性疼痛的重要类型之一，也是糖尿病最常见的并发症[1-2]。DNP是一种较为复杂的慢性疼痛状态，使患者的生活质量受到显著影响。目前治疗DNP主要采用药物治疗，但临床上常用的治疗药物疗效不佳或有严重的毒副反应。因此，亟待开发安全且有效的新型抗DNP药物。

钩吻素子(koumine, KM)是胡蔓藤属植物钩吻(GelsemiumelegansBenth.)中含量较高的一种单萜吲哚类生物碱单体[3]。研究显示，钩吻素子对慢性疼痛有良好的治疗作用，且毒性较低，但其机制有待于进一步研究[4-5]。本研究拟采用链脲佐菌素(streptozocin，STZ)诱导建立1型DNP大鼠模型，以机械刺激缩足阈(mechanical withdrawal threshold，MWT)为指标，观察连续多次钩吻素子灌胃对DNP的镇痛作用，观察该作用与脊髓别孕烯醇酮(allopregnanolone，AP)水平的关系，以期为钩吻素子的新药研究提供实验依据。

1 材料与方法

1.1材料

1.1.1动物 48只体质量180～200 g雄性SD大鼠，SPF级[北京市维通利华实验动物技术有限公司，许可证号：SCXK(京)2012-0001]。实验前适应性喂养1周，自由摄水摄食，所有操作均遵守国际及本地伦理委员会颁布的条例。

1.1.2试剂 钩吻素子粉末(由福建医科大学神经药理课题组提供，实验室制备批号KM201309)，纯度99%；加巴喷丁(上海信合化工有限公司)，纯度99%；水合氯醛(国药集团化学试剂有限公司)；STZ(美国Sigma公司)；AP ELISA试剂盒(美国Arbor assays公司)。

1.1.3仪器 Electronic Von Frey机械测痛仪(2390型，加拿大IITC Life Science公司)；精密电子天平(日本AND会社)；酶标仪(Epoch型，美国 BioTek 公司)；血糖仪(ONE-TOUCH 型，美国强生医疗器材有限公司)。

1.2方法

1.2.1大鼠MWT测定 参照文献[6]，大鼠预适应仪器30 min，待安静时，用Von Frey纤维丝刺激动物后足底部中间部位，大鼠出现突然缩足、抖足或添足，记为有效缩足反应，记录此时的刺激强度。……