山东地区439株非结核分枝杆菌临床分离株菌种鉴定及耐药情况

封彬彬 金锋 景辉 王俊玲 林美英 乔秀丽 李铭 邱丽华

非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacteria，NTM)在自然界中广泛分布，已知190余种[1]，人和动物均可感染，主要引起肺部病变等。我国NTM肺病的发生率呈明显上升趋势[2]，危害性日益凸显。NTM肺病的临床症状、影像学表现与肺结核相似，但治疗方案明显不同，极易误诊误治，迁延不愈[3]。为此，笔者回顾性分析山东地区NTM肺病患者临床分离株的菌种分布及耐药情况，为早期诊断及治疗NTM肺病提供依据。

材料和方法

1.菌株来源：收集2015年1月至2019年12月山东省胸科医院收治的经BACTEC MGIT 960培养阳性的疑似肺结核患者临床分离株，共计3783株，其中，439株鉴定为NTM，对可继续分型检测的354株NTM菌株进行菌种鉴定和耐药检测。354株NTM菌株分离自354例NTM肺病患者，其中，男230例(64.97%)，女124例(35.03%)；年龄范围为11～90岁，年龄中位数(四分位数)为60(50，66)岁；分离标本包括支气管毛刷物标本29份、肺泡灌洗液标本8份、痰液和(或)胸腔积液标本共计317份。

2.菌种鉴定：(1)初步菌种鉴定：按照《结核病实验室检验规程》[4]对BACTEC MGIT 960培养阳性菌株进行早期分泌蛋白(MPB64)抗原胶体金方法检测，阴性为NTM。(2)DNA微阵列芯片法菌种鉴定：严格按照说明书进行操作。以试剂盒自带的阴性和阳性对照作为质控，依次进行核酸提取、PCR扩增、芯片杂交、芯片洗涤和干燥、芯片扫描和结果判读。可检测临床常见的17种分枝杆菌，包括结核分枝杆菌复合群、胞内分枝杆菌、鸟分枝杆菌、脓肿分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、龟分枝杆菌等。(3)质谱菌种鉴定：采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)微生物鉴定系统对上述17种之外的分枝杆菌进行鉴定。……