C型凝集素识别受体2调控动脉粥样硬化平滑肌细胞增殖和表型转化的机制研究

徐玉顺 郑 丹 宋 伟

动脉粥样硬化(AS)是多数心血管疾病如心肌梗死、心绞痛、心力衰竭的主要致病因素，其主要病理过程是动脉内膜形成包含脂质、细胞、碎片和瘢痕组织的不稳定斑块[1～3]。平滑肌细胞(SMA)位于血管内侧层，正常生理条件下主要负责动脉的收缩和细胞外基质的产生，而在AS过程中，SMA由高表达平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin, α-SMA)的收缩型细胞转变为高表达骨桥蛋白(osteopontin， OPN)的增殖型细胞，同时高表达细胞增殖相关蛋白增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen， PCNA)，促进细胞向斑块内增殖迁移，加速斑块的形成，而其中的分子调控机制尚未明确。C型凝集素识别受体2(Dectin-2)是C型凝集素受体的一员[4]。有研究发现Dectin-2高表达于免疫细胞中，在多种真菌感染的免疫炎性反应中起到关键的调控作用[5]。而髓系缺失Dectin-2并不影响AS的病理进程[6]。本研究旨在探究SMA中Dectin-2在AS中的作用及其分子机制。

材料与方法

1.材料：(1)细胞株：原代人主动脉平滑肌细胞(批号：CC-2571)购自美国LONZA公司。(2)动物：6只Apoe-/-小鼠和6只C57BL/6(清洁级，6～8周龄，体质量20～25g，雄鼠)购买并饲养于浙江省医学科学院[使用许可：SYXK(浙)2019-0011]。饲养环境为清洁级，饲养条件：温度20±2℃，湿度50%±2%，标准光照12h /黑暗12h节律，自由饮水。C57BL/6采用普通饲料喂养，Apoe-/-采用高脂饲料喂养。(3)主要试剂：氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)(批号：1875610)购自赛默飞世尔科技(中国)有限公司；XTDMZYYH-1动脉粥样硬化模型饲料(批号：11984)购自江苏省协同医药生物工程有限责任公司；细胞增殖检测试剂盒(批号：6548)购自西格玛奥德里奇(上海)贸易有限公司；Edu细胞增殖试剂盒(批号：198421)购自上海碧云天生物技术有限公司；……