Hedgehog通路介导上皮-间质转化促进CCl4诱导的大鼠肝纤维化进展

浙江中医药大学附属第一医院 杭州 310006

肝纤维化是各种慢性肝病向肝硬化转变的必经阶段[1]，其病理学基础是活化的肌成纤维样细胞（myofibroblastic-like cell，MFLC）增多，细胞外基质（extracellular matrix，ECM）大量沉积[2]。研究认为，肝星状细胞（hepatic stellate cell，HSC）的活化在肝纤维化过程中起着关键作用[2-3]。近年研究发现上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）可能是肝纤维化的另外一条重要机制[4]。通过EMT，具有上皮表型的静止期HSC、肝细胞、胆管上皮细胞以及窦状内皮细胞等可转化成为具有间质细胞表型的MFLC，并参与肝纤维化的发生发展[5]。多种信号通路参与肝内细胞EMT的分子调控，Hedgehog通路可以促进肝脏祖细胞、胆管上皮细胞等从上皮表型向间质表型转变，影响EMT的发生发展[6]，通过抑制Hedgehog信号通路阻断或逆转EMT可望成为肝纤维化治疗的新靶点。本研究拟观察四氯化碳（carbon tetrachloride，CCl4）诱导肝纤维化发生发展过程中Hedgehog信号通路及EMT的变化，以进一步加深对肝纤维化发病机制的理解，为肝纤维化的防治提供新的切入点。

1 材料和方法

1.1 实验动物 无特殊病原体（specific pathogen free，SPF）级雄性SD大鼠64只，7～8周龄，体质量（140±10）g，购于上海斯莱克实验动物有限公司[实验动物生产许可证号：SCXK（沪）2013-0016]，饲养于浙江中医药大学动物实验研究中心屏障环境[实验动物使用许可证号码：SYXK（浙）2013-0184]，明暗各12h，温度（25±1）℃，相对湿度60%～70%。所有大鼠均予普通颗粒饲料喂养，自由饮水，适应性饲养1周后开始正式实验。

1.2 主要试剂 CCl4购于上海凌峰化学试剂有限公司（批号：20140319）；谷丙转氨酶（alanine aminotransferase，ALT）、谷草转氨酶（aspartate aminotransferase，AST）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）、总胆红素（total bilirubin，TBIL）检测试剂盒均购于上海申能-德赛诊断技术有限公司（批号：1412707020、14126070201、14104170202、14108170201）；……