柳 满,任 悦,高玉风,王 芳,余 佳
(中国医学科学院基础医学研究所 北京协和医学院基础学院 医学分子生物学国家重点实验室, 北京 100005)
人胚胎肾细胞系 293 (human embryonic kidney cell line,HEK293) 是一种最初来源于组织培养的人胚胎肾细胞的特殊细胞系。HEK293细胞是1973年在荷兰莱顿的 Alex van der Eb 实验室通过将健康人胚胎肾细胞中转化入人5型腺病毒DNA 片段培养转化而产生的。这种转化导致病毒基因组中大约4 500个碱基整合到人类HEK细胞的19号染色体中。这些细胞是来自于健康流产的胎儿,其母亲的身份和流产的原因尚不清楚。HEK293之所以这样命名,是因为它是 Graham 的第293次实验[1-2]。从细胞结构看 HEK293细胞具有复杂的核型,每条染色体有2个或更多的拷贝,被称为亚三倍体,染色体数目为64[3]。HEK293细胞具有转染效率高、易于大规模培养、表达蛋白结构接近其在体内的构象等特点。目前,HEK293细胞被广泛应用于蛋白质互作研究、药物筛选以及重组腺病毒包装等方面[4-6]。
翻译是蛋白质生物合成中的关键步骤,而翻译调控对于翻译过程来说具有重要意义。翻译的调控是十分精密复杂的,相比于转录调控,翻译调控更迅速、更高效,且可以通过对翻译的调控进一步控制不同蛋白的空间特异性以及弥补错误转录造成的危害[7]。目前,HEK293细胞在生物学领域应用较广,是大家公认的一种工具细胞系。而对于HEK293细胞基本翻译状态、翻译调控的研究及相关报道却比较少。本文主要对HEK293细胞中翻译调控进行研究探讨。
1.1.1 细胞:人胚胎肾细胞系HEK293(中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心)。……