流感病毒检测中细胞培养法与实时荧光定量PCR 法效果比较

王 颖

（天津市蓟州区疾病预防控制中心检验科，天津 301900）

流行性感冒（influenza）是一种由于流感病毒导致的急性呼吸道传染病，临床中较为常见，具有传播速度快、传染范围广、发病率高等特点，流感患者发病后临床症状主要表现为发热、头疼、寒战、全身酸痛等，对患者的生命安全及生活质量造成了严重的威胁[1]。为了进一步了解流感病毒的流行株构成、基因特异性以及抗原性，预防流感的扩散，及时、有效的监测至关重要[2]。目前，临床检测流感病毒的方法较多，如胶体金快速检测、细胞培养等[3，4]。实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）技术在1996 由美国研究人员发明，和传统的PCR 技术相比，提高了其环保型，且具有自动化的特点，检测特异度高[5]。该技术能够通过扩增的方式，作用于每一个循环产物的荧光信号，从而提高信号的强度，当一个循环结束后，会被荧光强度信号收集，能够通过荧光强度观察产物量的变化，从而建立荧光扩增曲线图[6]。因此，本次研究对比了细胞培养法与实时荧光定量PCR 法检测流感病毒的效果，具体报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2018 年10 月～2020 年10 月天津市蓟州区疾病预防控制中心的604 例疑似流感样本作为研究对象，所有样本均在24 h 内送至实验室进行检测，无法在24 h 内送检的样本，置于-70 ℃的环境中保存。

1.2 方法

1.2.1 实时荧光定量PCR 法 通过核酸提取盒实时荧光定量PCR 法提取样本。ABI7500 Fast 实时荧光定量PCR 仪，由美国Thenmo 公司提供，核酸提取采用RNA 病毒提取试剂盒RNeasy Mini Kit，由德国QIAGEN 公司提供，PCR 反应试剂由硕世生物科技有限公司提供。……