量子点的制备及其与葡萄球菌蛋白A偶联条件的优化

王伟， 曹霞， 童珊珊， 余江南， 徐希明

(江苏大学药学院， 江苏 镇江 212013)

葡萄球菌蛋白A(Staphylococcal protein A, SPA)是一种存在于葡萄球菌细胞壁的表面蛋白[1]，约占整个细胞壁蛋白质成分6.7%，通过羧基端与细胞壁肽聚糖呈共价连接。SPA多肽链由A、B、C、D、E五个同源区组成，每个同源区都能与人及某些哺乳动物血清中IgG的Fc片段结合，同时又不会对抗体分子Fab片段与抗原结合位点的活性产生影响[2]。另外，SPA在与IgG的Fc片段结合的同时还能固定酶、荧光标记物等。

荧光免疫层析技术是一种基于抗原抗体特异性反应的新型膜检测技术[3]。其中，荧光标记物包括荧光素[4]、胶体金[5]、量子点[6]等，其中量子点激发光谱宽、发射光谱窄[7]，荧光发射强度强而稳定，耐光漂白，成为荧光免疫层析检测领域的新热点。在荧光免疫层析技术的应用中，每检测一种抗原或抗体都需要将荧光标记物固定于相应的抗原或抗体上，探索最优结合条件，这为荧光免疫层析技术的广泛应用带来了不便。因此，作者提出一种设想，将荧光标记物与SPA结合而形成结合物，该结合物可以与人血清中的一些抗体结合而不影响该抗体与抗原结合位点的活性。

1 材料与方法

1.1 材料

CdCl2·2.5H2O、硼氢化钠、碲粉、丙酮和甲醇(国药集团化学试剂有限公司)；巯基丙酸和罗丹明B(阿拉丁试剂有限公司)；SPA购自南京福麦斯公司；1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)，N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)均为美国Sigma公司产品；琼脂糖(德国Biofroxx公司)；超纯水(上海Canrex分析仪器)。

1.2 方法

1.2.1 碲化镉量子点的制备