以钩端螺旋体重组蛋白为包被抗原的间接ELISA 检测试剂盒的研制与性能评测

钱 杰，杨 坚，张 玥，张 蓉，张湘燕，郭晓奎，

1.上海交通大学医学院免疫学与微生物学系，上海200025；2.上海科新生物技术股份有限公司，上海201203；3.上海交通大学医学院-国家热带病研究中心全球健康学院，卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室，上海200025

钩端螺旋体病是一种由致病性钩端螺旋体（简称钩体）感染而引起的人兽共患病。该疾病在我国多省市均有流行，被列为法定报告传染病。其好发于雨季及洪涝灾害地区，啮齿类动物、犬、猪等为重要传染源［1-2］，对人畜危害较大［3］。钩体病的主要临床表现为发热、寒战、黄疸、出血、肝脾肿大、肾功能衰竭等，与流行性感冒、病毒性出血热、脑膜炎、登革热、疟疾等传染性疾病及肾盂肾炎、化学中毒和食物中毒等非传染性疾病相类似。目前，实验室钩体培养法和基于活的钩体标准菌株的显微镜凝集试验（microscopic agglutination test，MAT）仍是诊断和监测钩体病的金标准［2］，且国内尚无对钩体感染者进行钩体抗体检测的成品试剂盒。

钩体外膜具有抗原性，是抗体和补体的作用部位。钩体外膜蛋白（outer membrane proteins，OMPs）参与钩体与宿主黏附，在引起宿主免疫和致病过程中发挥着重要作用［4］。2003—2004 年中国问号钩体赖型赖株与巴西钩体哥本哈根型的全基因组测序完成，共报道了数百种可能与OMPs 相关的基因［5-6］，该项工作为遴选钩体保守的OMPs及免疫检测靶抗原提供了可能。

本研究选择我国主要致病性钩体流行株的高度保守的OMP 重组蛋白作为包被抗原，经临床样本测试后建立……