牛成纤维细胞的鉴定方法

高美红 许晓玲 白佳桦 刘彦 杨凌

（1，河北工程大学，056000；2，北京市农林科学院畜牧兽医研究所 100097）

自从“多莉”诞生以来，多种哺乳动物已经通过体细胞核移植（SCNT）技术成功获得克隆个体。SCNT 克隆技术将供体细胞的细胞核注入到去核的卵母细胞中，融合后通过体外发育创造出一个可存活的胚胎，然后将其移植到受体动物子宫内进行繁殖[1]。尽管在过去十年中很多科学家为改进该项技术作出了重大努力[2]，但目前克隆效率仍然低下。在所有影响克隆效率因素中，核供体细胞是其中关键因素之一。供体细胞类型及细胞所处的周期都影响克隆胚胎的发育[3]。

成纤维细胞是一种用于体细胞克隆常用的供体细胞[4]，在SCNT 研究中广泛应用[5,6]。目前已成功将家畜成纤维细胞用于体细胞核移植技术。通过体细胞核移植到卵母细胞中进行克隆是目前生产优质种畜和转基因动物，保护濒危物种最有效的技术[7]。成纤维细胞体外培养时贴附快，增殖分裂能力强、生长速度快，形态特征明显极易观察区分，是取材方便，培养简单且稳定性、一致性高的细胞类型之一，常用于二倍体细胞功能和细胞系建立的相关研究[8]。

1 成纤维细胞的来源和特征

成纤维细胞是基于形态学特征(拉长的纤维形状) 定义的。在形态上，成纤维细胞是扁平的纺锤形细胞，缺乏基底膜，细胞核呈圆形拉长，被巨大的内质网包围。成纤维细胞是最丰富的间质细胞类型[9]。被认为是产生和降解细胞外基质最重要的细胞，也被认为在间质纤维化中起关键作用。……