木犀草素对Aβ25-35 损伤PC12 细胞氧化应激及Tau 蛋白磷酸化的影响

伊金月，张智博，姚 远，邢怀玉，李庆伟，张 宁,，徐红丹,*，孙慧峰*

(1.黑龙江中医药大学 药学院，黑龙江 哈尔滨 150040；2.黑龙江中医药大学 佳木斯学院，黑龙江 佳木斯 154007)

阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）是最常见的神经退行性疾病，伴随着学习、记忆和认知功能的逐渐衰退[1]。AD 其病理特征是神经元凋亡，老年斑（SPs）沉积以及在大脑皮层和海马的局限区域形成神经纤维缠结。淀粉样蛋白β（Amyloid beta，Aβ）是SPs 的主要组成部分，Aβ 的聚集和沉积导致脑内大量神经元死亡。木犀草素是一种植物雌激素，主要存在于补肾中药骨碎补中，具有雌激素样作用。有研究表明，木犀草素能减轻淀粉样β 蛋白诱导的神经毒性[2]，并诱导PC12 细胞突起生长，增强细胞抗氧化防御能力[3]。木犀草素具有神经保护作用，但其促神经发生作用的详细分子机制仍然有限。PI3K/Akt 细胞信号通路在调节细胞分化、增殖、存活和抗氧化方面起着至关重要的作用。当PI3K/Akt 通路被激活时，Akt 磷酸化激活下游转录因子，起到抗氧化作用，这被认为是细胞氧化损伤的保护机制之一。本实验应用PI3K 阻断剂LY294002 进行干预，观察木犀草素处理后PC12 细胞的氧化损伤以及PI3K/Akt途径关键分子及蛋白的变化，探讨木犀草素的保护功能是否和PI3K/Akt 途径相关，进一步阐明木犀草素抗Aβ 损伤PC12 细胞的作用机制，从而为AD 的临床治疗提供新的见解。

1 材料与方法

1.1 材料

PC12 细胞购自中国科学院细胞库；木犀草素（成都曼思特生物科技有限公司）；Aβ25-35（北京Bioss 生物技术有限公司）；胎牛血清（FBS）、高糖培养液（DMEM）、双抗、胰蛋白酶（Hyclone 公司）；……