梨小食心虫细胞色素P450 CYP6AE123 基因的克隆及表达分析

韩 慧，王彪龙，李 恩，胡 军，马瑞燕，高玲玲，郭艳琼

（1.山西农业大学植物保护学院，山西太谷030801；2.澳大利亚联邦科学与工业研究组织农业与食品部，文布利西澳6913）

梨小食心虫Grapholita molesta（Busck）属鳞翅目卷蛾科小食心虫属，在全世界广泛分布，主要为害桃、梨等经济作物，导致果品产量和质量严重下降[1-6]。目前，常用的防治手段为化学防治，但长时间的不合理用药导致梨小食心虫对某些杀虫剂敏感度降低[7]。已有不少研究表明，细胞色素P450 在昆虫对杀虫剂的代谢中起着非常重要的作用。

细胞色素P450（Cytochrome P450，CYP）是一类能够代谢昆虫内源化合物（如激素等）和外源性化合物（如植物次生物质、杀虫剂等）的酶系，在昆虫的解毒、细胞代谢和平衡中起着关键作用[8]。CYP 酶的诱导或抑制是昆虫与药物相互作用的基础，它可以使昆虫产生拒食、趋避、中毒等症状。细胞色素P450 具有多个进化支，包括CYP2、CYP3、CYP4 以及线粒体CYP 簇[9]，其中CYP3 簇最大，包含CYP6、CYP9 家族在内的多个家族。CYP6 家族属于昆虫特有的家族，不少研究证明，该家族基因参与外源物质的代谢。例如飞蝗CYP6 家族参与了外源杀虫剂的代谢[10]，其中CYP6HC1与CYP6HCL1在氨基甲酸酯类和拟除虫菊酯类杀虫剂代谢中起关键性作用[8]；冈比亚按蚊CYP6M2基因可对多种不同类别的杀虫剂产生耐药性[11]。此外，目前常用的杀虫剂有阿维菌素、吡虫啉以及高效氯氟氰菊酯等。其中，阿维菌素因其杀虫效果好、对人畜毒性低等优势被广泛应用于梨小食心虫的防治[12]。

本研究从前期构建的转录组数据库进行BLAST 检索，获得一个细胞色素P450 基因序列。……