脉冲群电磁场对体外培养成骨细胞增殖与矿化的影响

高玉海，何文芳，刘 菁，任 莉，吴思敏，陈克明

脉冲电磁场(PEMFs)为一种良好的生物物理治疗方法，已有诸多文献报道了其具有促进成骨细胞增殖与成熟矿化、增加青年大鼠峰值骨量、促进骨折愈合的作用[1-3]。因PEMFs具有无创伤、无感染、操作简单、无不良反应等特点，近年有学者将其用于神经修复、腰椎间盘突出症治疗等方面的研究[4-5]。脉冲群电磁场(PGEMFs)作为PEMFs的一种改良，作用效果如何尚未有文献报道。课题组前期已筛选出PEMFs促进成骨细胞增殖与成熟矿化的最佳作用频率、强度和时间，但动物实验结果表明，其存在一定的不稳定性。故本实验旨在通过观察PGEMFs对体外培养大鼠成骨细胞(ROBs)增殖与矿化的影响，以期为增加骨形成提供新思路。

1 材料与方法

1.1PGEMFs发生装置 PGEMFs电源由课题组联合中国科学院兰州近代物理研究所电源室研发(尚未申请专利)。该电源能够实现脉冲波、脉冲群波的稳定输出，通过连接计算机，运用自主设计的控制软件实现时间、频率、强度及脉冲波与脉冲群波的不同比例混合等。电源连接线圈可产生一定范围的均匀磁场，并能放置于细胞培养箱内。

1.2仪器与试剂耗材 CO2培养箱(Thermo Revco公司，美国)；倒置相差显微镜(Olympus公司，日本)；台式高速离心机(Heraeus公司，德国)；高速冷冻离心机(湘仪实验室仪器开发有限公司，中国)；低速离心机(北京医用离心机厂，中国)；酶标仪(Bio Tek公司，美国)；1000 ml、100 μl、10 μl移液枪(Eppendorf公司，德国)。

α-MEM培养基(Gibco公司，货号：2090463)；胎牛血清(Lonsera公司，货号：S711-001S)；青链霉素混合液(索莱宝公司，货号：P1400)；胰蛋白酶-EDTA溶液(索莱宝公司，货号：T1300)；……