miR-193a-5p靶向VASP干扰PI3K/AKT信号通路抑制胃癌细胞增殖和诱导细胞凋亡的机制研究

殷玉敬，高 辉，岳 林，杨文涛，薛丽英

胃癌是多因素参与的复杂病变过程，是人类常见的恶性肿瘤[1-2]。miRNA可参与多种信号通路调节，通过激活或抑制相关信号通路影响胃癌细胞的增殖、侵袭、转移、凋亡等生物学功能，与胃癌的发生发展密切相关。miR-193a-5p在肺癌、膀胱癌、食管鳞状细胞癌等癌症中显著下调[3]。Xiao等[4]证实miR-193a-5p作为抑癌miRNA已被用于胃间质瘤的诊治靶点研究。PI3K/AKT信号通路活化可以抑制多种刺激诱发胃癌细胞凋亡，促进细胞周期进展、血管生成和转移[5]。VASP是一种和肌动蛋白调节相关的多功能蛋白，研究表明miR-4455通过下调VASP可抑制PI3K/AKT信号通路活化，进而抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭[6]。通过生物信息学分析发现VASP可能是miR-193a-5p的靶基因，但miR-193a-5p是否靶向VASP调控PI3K/AKT信号通路，进而影响胃癌细胞增殖和凋亡尚不清楚。因此，本研究旨在探讨miR-193a-5p对胃癌细胞增殖和凋亡的影响，并分析VASP和PI3K/AKT信号通路的潜在作用，以期为治疗胃癌提供有价值的靶点。

1 材料与方法

1.1细胞和主要试剂 人胃黏膜上皮细胞株GES-1购自美国细胞培养收藏中心；人胃癌细胞株BGC-823和SGC7901购自中国科学院上海细胞研究所。DMEM培养基、RPMI-1640培养基、青霉素、链霉素购于Hyclone公司，胎牛血清购于Gibco公司，CCK-8试剂和胰蛋白酶购于Sigma公司，miRNeasy Mini Kit试剂盒、miRNAeasy提取试剂盒购于Qiagen公司，RT-qPCR购于宝生物工程(大连)有限公司，miR-NC、miR-193a-5p mimics、anti-miR-193-5p购于上海拓然生物科技有限公司。VASP干扰RNA和对照干扰RNA均由上海生物工程有限公司合成构建。RIPA裂解液、结晶紫染色液、BCA试剂盒、ECL化学发光试剂盒、辣根过氧化酶标记的……