隋利萍, 李清华, 李 健, 赵运华, 郭有新, 郑家华
(河北省承德市中心医院耳鼻喉科,河北 承德 067000)
世界上大约有5亿人患有过敏性鼻炎,这导致成人和儿童的生活质量下降,不仅在身体方面,而且在心理功能方面,增加了社会开支[1]。过敏反应的特征包含抗原特异性免疫球蛋白E(IgE)的产生;辅助性T细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞增多;过敏介质的释放等。目前,该病的治疗包括避免过敏原和药物,包括皮质类固醇、抗组胺药、抗胆碱药、减充血剂、白三烯受体拮抗剂、肥大细胞稳定剂和免疫治疗,这些药物大多会引起各种副作用[2]。研究表明,sRAGE可通过竞争性结合RAGE而抑制其介导的炎症反应[3]。一氧化氮(NO)是一种信号分子,由精氨酸产生,具有多种生理功能。变应性鼻炎患者鼻内NO浓度升高。既往研究显示,高胆固醇患者配体-RAGE轴的激活可增加NO的合成[4]。因此,本实验旨在探讨sRAGE在小鼠变应性鼻炎模型中的作用及一氧化氮途径的作用。
1.1材料:试剂:蛋白定量BCA试剂盒购自北京普利莱基因技术有限公司;RIPA裂解液购自武汉博士德生物工程有限公司;PMSF购自中国碧云天生物技术研究所;离心机(Medifuge公司,意大利);卵清蛋白,一种用于触发T细胞活化的药物(Sigma,美国);Al(OH)3[氢氧化铝](Sigma,美国);sRAGE购自北京爱迪博生物科技有限公司;一抗(iNOS,β-actin)购自Abcam公司;细胞总RNA提取试剂盒、一步法实时定量荧光聚合酶链反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)试剂盒(TaKaRa公司,日本)。
1.2动物模型和实验分组:选择Balb/c小鼠(8周龄,雌性),体重为20~22g。随机分为三组,每组6只,分别为对照组(n=6),变应性鼻炎组(n=6),sRAGE干预的变应性鼻炎组(n=6)。……