TGF-β1对大鼠肾小球系膜细胞纤维化蛋白及长链非编码RNA uc.412表达的影响

杨思慧，王锦，黄婵，安梦如，张爱青，甘卫华

南京医科大学第二附属医院，南京210003

慢性肾脏病（CKD）是由多种原因引起的慢性肾脏结构及功能障碍，肾纤维化是其主要病理学基础。转化生长因子β1（TGF-β1）具有调节细胞生长、分化、凋亡和迁移等多种生物学活性，能够介导肾小球系膜纤维化，是肾脏纤维化发病机制中的关键介质［1-3］。Smad蛋白是TGF-β下游的主要效应蛋白，在肾脏受到各种病理性因素（缺血、缺氧或高糖等）和外界环境诱导因素时，活化的TGF-β1结合Ⅰ型和Ⅱ型TGF-β受体以及受体相关Smad（R-Smad），即Smad2和Smad3；磷酸化的Smad2/3与Smad4形成低聚物，进入细胞核调控下游靶基因的转录，诱导纤维化相关蛋白α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）及胶原蛋白（Collagen）形成，进一步诱导肾小管上皮—间充质转化（EMT），从而促进肾纤维化［4-5］。长链非编码RNA（lncRNA）虽然不参与编码蛋白质，但可作为重要的调控分子发挥多种生物学功能，在某些细胞的增殖调控中发挥重要作用［6］。本课题组前期通过高通量lncRNA微矩阵芯片技术在TGF-β1处理的系膜细胞中筛选出lncRNA uc.412，证实其表达与系膜细胞增殖密切相关，但其在系膜细胞中的具体生物学功能尚不明确［7-9］。SIS3是Smad3磷酸化特异性抑制剂，2020年6—11月，本研究采用SIS3抑制TGF-β1诱导的Smad3磷酸化，观察TGF-β1诱导大鼠肾小球系膜细胞纤维化蛋白表达的作用，并进一步探讨其作用机制与lncRNA uc.412的关系，为临床防治肾纤维化相关的CKD奠定基础。

1 材料与方法

1.1 细胞与试剂 大鼠肾小球系膜细胞HBZY-1细胞株购自中国典型培养物保藏中心。过表达慢病毒lncRNA uc.412购自上海吉凯……