基于血清蛋白组学探讨黄芩清热除痹胶囊改善急性痛风性关节炎急性炎症的作用研究

孙广瀚，刘 健*，万 磊，刘 维，龙 琰，鲍丙溪，张 颖

1.安徽中医药大学第一附属医院 风湿免疫科，安徽 合肥 230031

2.天津中医药大学第一附属医院 风湿免疫科，天津 300000

急性痛风性关节炎（acute gouty arthritis，AGA）是一种关节疾病，其特征是尿酸单钠（monosodium urate，MSU）晶体在关节及其周围组织中积聚，属于代谢性的风湿病[1]。有研究表明MSU晶体主要通过激活Toll样受体和含NACHT‑LRR‑PYD结构域蛋白3炎性小体信号传导导致AGA的发作[2]。通过筛选和鉴定疾病中差异表达的蛋白质，可以用于疾病发生发展的预测和诊断[3]。其中Raybiotech的抗体阵列有固定的抗体，可以鉴定培养基或体液中的分子生物，并用于蛋白质表达谱分析，这些蛋白质可以成为疾病的生物标志物，如朱佳宁等[4]利用AAH‑ΒLG‑507芯片试剂盒检测息肉状脉络膜血管病变血清特异性蛋白。

黄芩清热除痹胶囊（Huangqin Qingre Chubi Capsules，HQC）具有清热利湿、通络止痛之功，是健脾化湿清热法具体体现的代表方剂，前期研究表明HQC内服配合芙蓉膏外敷治疗AGA疗效显著[5‑6]，而且能够通过腺苷酸活化蛋白激酶（adenosine monophosphate activated protein kinase，AMPK）‑叉头框蛋白O3a（forkhead box O3a,FOⅩO3a）‑锰超氧化物歧化酶（manganese superoxide dismutase,superoxide dismutase 2，MnSOD）信号通路改善氧化应激状态[7]。本研究基于血清蛋白质组学来识别可能引发AGA的特异性蛋白质，然后观察HQC改善AGA患者炎性反应的情况，探究其可能的机制。

1 材料与方法

1.1 药品与试剂

HQC来自安徽中医药大学第一附属医院制剂中心，批号Z20120503；兔抗白细胞介素‑8（interleukin‑8，ⅠL‑8）抗体（批号AA01151）由Βioworld公司提供；兔抗肿瘤坏死因子受体超家族成员ⅠⅠ（tumor necrosis factor receptor ⅠⅠ，TNF‑RⅠⅠ）抗体（批号00055382）由Proteintech公司提供；兔抗巨噬细胞炎性蛋白1β（macrophage inflammatory protein 1β，MⅠP‑1β）抗体（批号GR2351556）由Abcam公司提供；兔抗粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（granulocyte macrophage colony stimulating factor，GM‑CSF）抗体（批号25）由CST公司提供；……